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lfgc8505

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE电泳条带上面清楚,下面模糊,为什么?

SDS-PAGE电泳条带上面清楚,下面模糊,为什么?
小虫最近在做SDS-PAGE电泳,用的是15%的分离胶,跑全菌蛋白,但是每次结果都是上面的(大蛋白)清楚,而最下面的小蛋白(10KD以下)却是一片弥散,不成条带!
胶应该没问题,因为实验室其他人也是用一样的东西配的,都没什么问题。
百思不得其解,故来此请教各位虫友们!
还请各位不吝赐教!小虫在此先谢了!
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议换一下分离胶和浓缩胶的缓冲液,我之前有类似情况,换了一下缓冲液就好了!
平和悦衲!
2楼2010-03-22 08:19:32
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

你的目标蛋白分子量也是6KD左右的么?

引用回帖:
Originally posted by haoqian6135 at 2010-03-22 08:19:32:
建议换一下分离胶和浓缩胶的缓冲液,我之前有类似情况,换了一下缓冲液就好了!

你的目标蛋白分子量也是6KD左右的么?
我的感觉大概从12KD开始就胡了,弥散了~
你说的换是重新配么?
3楼2010-03-22 22:47:34
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jAnmee

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一起关注。。。我没碰到这个问题,但是最近也在做SDSPAGE
国荣,家驹,MJ,为什么我喜欢的恩都死了。。。。
4楼2010-03-23 05:47:17
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是样品的问题呢?我没有出现过这种情况啊
5楼2010-03-23 09:07:14
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lfgc8505

金虫 (小有名气)

可是我师姐他们也是这样做的啊,但是没听说她们有过这样的情况啊 ?

引用回帖:
Originally posted by xiaoyu1014126 at 2010-03-23 09:07:14:
是不是样品的问题呢?我没有出现过这种情况啊

可是我师姐他们也是这样做的啊,但是没听说她们有过这样的情况啊 ?
6楼2010-03-23 23:56:01
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段家一凡

木虫 (正式写手)

10kd一下一般都是模糊的吧,我跑的是10%的胶。
7楼2010-03-24 00:34:42
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