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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电转杯宽度问题
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漫迹

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】电转杯宽度问题

我做细菌的电转，老师让我用2mm的电转杯，我不明白什么时候用1mm的电转杯，什么时候用2mm的电转杯，两者的区别是什么，2mm的转化效率比1mm的高么，请大家指点下，谢谢了哦
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1楼2010-03-20 13:58:27
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
区别：电击杯有三种型号：
     0.4 cm 间距电击杯：宽间距、低场强、应用于哺乳动物细胞和其它真核细胞

    0.2 cm 间距电击杯：窄间距、高场强、应用于酵母、细菌和其它真核细胞

    0.1 cm 间距电击杯：最窄间距、极高的场强，浅底用于小体积样品(40–80 µl)应用于酵母和细菌转化
    可能你的细菌细胞壁相对比较薄吧 ，用1mm的话致死太高吧
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-03-20 14:07:48
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漫迹

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-03-20 14:07:48:
区别：电击杯有三种型号：
     0.4 cm 间距电击杯：宽间距、低场强、应用于哺乳动物细胞和其它真核细胞

    0.2 cm 间距电击杯：窄间距、高场强、应用于酵母、细菌和其它真核细胞

    0.1 cm 间距电击杯： ...

那一般 0.1 cm ；0.2 cm 间距电击杯在电转的时候加入的电转溶液体积为多少时效率比较高呢，我用0.2 cm 间距电击杯，每次加入190ul的感受态和10ul的质粒，我看别人有用100ul总体系的，不知道这个有规律么
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3楼2010-03-20 15:08:33
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
晕，质粒的浓度很高的，加1ul就足够足够多了。很多时候都是小提的质粒稀释后点击的。
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4楼2010-03-20 15:23:15
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