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【求助/交流】夹心杂交实验
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请高手赐教有关夹心杂交的实验， 我在做的实验卡在夹心杂交这一步好久啦， 我是将氨基标记的捕获探针偶联到磁粒上，然后加PCR产物进行杂交，杂交完进行洗涤后再加生物素标记的信号探针进行第二步杂交，最后通过链亲和素-碱性磷酸酶以及PNPP反应显色信号来检测，可是做的阴性的信号居然比阳性的稍高，改变操作步骤、试剂的用量、杂交的时间、杂交液的成分还是没啥效果，眼看快要写毕业论文了还做不出来急死人啦，请问哪位知道什么原因吗？或者做过夹心杂交的人谈谈你们做杂交时须要注意的事项。万分感谢！ 可能这里表达不太清楚，如有帮助者也可电话或者QQ联系，我的QQ是274694570 |
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