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小南瓜3820

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助:黄酮的纯化方法已有9人参与

我分的一个较纯的黄酮类化合物,跑板在紫外下显示一个点,但这个点里面会有暗斑。刚开始以为是展开系统没调好,换了很多系统还是没有分开,这种现象是怎么回事?应该是没有分纯吧?也试过用凝胶柱分,效果也不是很理想,请高手们指点一下吧!用什么方法才能使其纯化呢?谢谢了!

[ Last edited by novus on 2011-6-13 at 21:20 ]
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popcosen

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-06-17 19:15:32
引用回帖:
Originally posted by 小南瓜3820 at 2010-03-30 17:26:18:
确定不是单体,试了各位的方法还是没分开,急坏我了。。。怎么办啊?

黄酮类化合物的极性很接近,有时看着像一个点,其实是2个以上的点,你可以先打核磁,通过碳谱确定是否为单体,如果不是,你可以打个质谱,看看是否为同分异构体。如果能确定其化学结构,可以不用再分了。如果想做生物活性测试或者是未知化合物或者是新化合物,可以做制备液相。

多次跑小板有时可以确定是否为单体化合物,具体做法是:先跑一次小板,吹干,再使用同样的展开剂跑一次,吹干,再看看紫外灯是否为一个点?!你可以试试,这办法很好!
20楼2011-06-17 17:02:22
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xly103

木虫 (著名写手)

★ ★
小南瓜3820(金币+1):谢谢参与
karl2100(金币+1):谢谢您的建议! 2010-03-19 14:51
建议用Sephadex-LH20柱,洗脱为氯仿:甲醇=1:1
2楼2010-03-18 17:24:56
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catjaja

金虫 (著名写手)

★ ★
小南瓜3820(金币+1):谢谢参与
karl2100(金币+1):谢谢提供! 2010-03-19 14:51
应该是一个化合物,这个点里面会有暗斑可能是毛细管中央浓度大,周围扩散的浓度小引起的,不建议Sephadex-LH20柱,不同黄酮分子量极为接近,用Sephadex-LH20柱纯粹浪费时间
3楼2010-03-18 17:32:48
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cjtyyh

银虫 (小有名气)


小南瓜3820(金币+1):谢谢参与
个人建议也是同一个物质,应该是毛细管吸附作用引起的
4楼2010-03-19 10:49:46
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