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johncena

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[交流] 【分享】RP-HPLC中，甲醇的洗脱能力竟然比乙腈强已有8人参与

如题，开始用甲醇和水作的流动相，觉得出峰时间有些晚，主峰和杂质有点没分开，换用等比例的乙腈和水，却发现出峰时间反而推迟了很长时间。最后干脆用纯甲醇和纯乙腈做了一下对比，结果甲醇的出峰时间还是要比乙腈早很多，应该乙腈的洗脱能力要强于甲醇啊，头一次做出这样的，很是困惑。。。

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1楼2010-03-18 15:10:52

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johncena

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一直都没有及时来补充贴子，不过看了大家的意见后，我也说说自己在这次实验中的认识：
1.大部分的资料都说的是甲醇的极性要大于乙腈，而在反相中，固定相的极性小于流动相的极性，选取极性相对于小一些的更容易争夺吸附在固定相上的样品，也就是说大极性的洗脱能力一般要低于小极性的溶剂。我在网上看过一篇关于甲醇和乙腈之间的等效极性换算，结果是40％乙腈＝50％甲醇。这个未曾考证，仅供参考。
2.另外我觉得两者的洗脱能力还与其对物质的溶解性相关。后来发现我的样品在乙腈中的溶解性远不如甲醇（好在它还是溶解的，不然就犯错误了呵呵），本来以为增加乙腈的比例可以让保留时间提前，结果不但没有提前，反而峰形变得非常怪异，并且峰宽也随着乙腈比例的加大，变得很宽（因为乙腈溶解性差了点，所以乙腈比例越大，样品冲出柱子的时间也就会相应延长），如果提前就做过乙腈和甲醇对该物质溶解性的对比，那么一切就变得好解释多了。

感谢大家的回复，仅就这次实验现象来为大家提供个参考。