| 查看: 524 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 qingzi8575 的 1 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
qingzi8575银虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】DNA银染高灵敏度的方法
|
||
谁知道比较好的DNA银染方法阿，灵敏度高的，最好亲手操作过知道效果 |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有118人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
yujiaping1
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1365.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 1174
- 在线: 66.6小时
- 虫号: 929883
- 注册: 2009-12-17
- 性别: MM
- 专业: 疫苗学
qingzi8575(金币+8):谢谢 2010-03-18 10:13
|
①固定:将凝胶板(胶已沾于其上)置于ZL冰醋酸溶液(10%)中，轻轻摇荡直至 颜色褪净为止，一般需要25一30分钟; ②漂洗:用ZL蒸馏水漂洗2次，每次5分钟; ③染色:在ZL新配的染色液(0.1%ANg03，3m137%甲醛)中，轻轻摇荡30分钟; ④漂洗:用ZL蒸馏水漂洗，时间不超过10秒; ⑤显影:在ZL显影液中(含无水NaZCO:609，IOmg/mlNaZsZO:400林l，37%甲醛 3ml。提前配制，4℃冰箱中预冷2小时以上)轻轻摇荡，直至出现带纹; ⑥定影:在ZL10%冰醋酸溶液中定影5分钟; ⑦漂洗:用ZL蒸馏水漂洗5分钟; ⑧干胶:室温下自然晾干24小时以上。 这个是染变性胶的，慢点，但背景浅，灵敏度高，但操作要求也高一些 |
3楼2010-03-17 13:01:32
yujiaping1
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1365.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 1174
- 在线: 66.6小时
- 虫号: 929883
- 注册: 2009-12-17
- 性别: MM
- 专业: 疫苗学
★ ★ ★ ★
qingzi8575(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3): 2010-03-17 12:35
qingzi8575(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3): 2010-03-17 12:35
|
2.3.1.5 银染 参考(Dinesh et al., 1995)等的银染方法，对聚丙烯酰胺凝胶进行染色。具体操作如下： 1. 清洗。将两块玻璃板分开，将胶滑入去离子水中，清洗一下。 2. 染色。倒掉去离子水，加入0.1%的AgNO3溶液，将整个胶片没过即可(容器底部较平，只需要极少的AgNO3溶液)，放到摇床上，缓慢摇荡10 min即可。 3. 清洗。用大量去离子水快速清洗掉胶表面的AgNO3溶液。 4. 显色。倒掉去离子水，迅速倒入新配的显色液(5 g NaOH，0.1 gNaCO3，2.5 ml 37%的甲醛溶液，定容至250 ml)，迅速放到摇床上摇荡，至条带清晰后用自来水冲净显色液。 5. 用凝胶成像系统拍摄或扫描胶片即可。 该方法是染非变性胶的简便方法，灵敏度一般，我还有一个灵敏度高的，再找找 |
2楼2010-03-17 12:27:55
