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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于酵母 质粒问题

1、我做的酵母表达,听说转入酵母的质粒都会与酵母菌基因组整合到一起,如果是那样的话,岂不是没有质粒存在了?也就没办法提取质粒验证转化的结果了??
2、可是现在还有酵母质粒提取试剂盒啊!~
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见得多爱的多
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zhyzx

金虫 (小有名气)

应该不会或者不全部出现这种状况吧
2楼2010-03-16 15:00:53
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

酵母质粒分整合型,和附载型。整合型需要提酵母基因组DNA进行验证。
Thank-you,so-blue.
3楼2010-03-16 15:18:11
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GeminiRR

铜虫 (小有名气)

说的很对的,不是所有的都会整合,具体要看你转化的质粒的类型。
酵母质粒提取试剂盒是有的,你可以搜索一下。关键在于酵母的破碎,需要使用酸洗的玻璃珠来强化破碎。
4楼2010-03-16 16:32:26
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

毕赤酵母基本都是整合表达 酿酒酵母两种都有可能。 我现在做的实验一部分是构建自主复制质粒使其能在比赤酵母中游离表达。
仕不可不弘毅,任重而道远
5楼2010-03-16 17:33:27
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pidou213

木虫 (正式写手)

您的意思是比赤酵母用任何质粒转入进去都是整合表达么??


谢谢
引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2010-03-16 17:33:27:
毕赤酵母基本都是整合表达 酿酒酵母两种都有可能。 我现在做的实验一部分是构建自主复制质粒使其能在比赤酵母中游离表达。

见得多爱的多
6楼2010-03-16 19:58:07
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pidou213

木虫 (正式写手)

我用的是pPICZA质粒,请问转化进毕赤酵母内以后,能否再次提取出质粒呢?



谢谢

期待您的回复。。。
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-03-16 15:18:11:
酵母质粒分整合型,和附载型。整合型需要提酵母基因组DNA进行验证。

见得多爱的多
7楼2010-03-16 19:59:34
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