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cxy3358519

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】引物设计

1 ctcctctctc cgccggcaac cttattggta tcaagaaaaa cttgtcgaaa aatacacagg
   61 gcacaatgtg cggaggcgcc atcctcgcgg agctgatccc gccgacgcgg cgcgtggcgt
   121 cgaagccggt gacagaaggc cacctctggt cggcgagctc caagaaagcc ggcagcggca
   181 gggacaagag gcaccagcac gaatacgccg acgatgactt cgaggccgcc ttcgaggact
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   361 ggcgccagtt ccgcggcatc cggcagcggc cctggggcaa gtgggcggcg gagatccgcg
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   1201 cgtactcgtc tggtatttcc tactgtgggt caatggttcc tatgaatttg ttcacgtcgg
   1261 cgaaactctg tattgtacgg tcgtgattga tgtgccaaat taaataagcc tgtgaacctg
   1321 gttctatgta tatatggtat cttgattatg
//
上面的就是我的目的cDNA序列，我想扩增ORF全长，但是几个月来一直扩增不出来，不知道是反转录的cDNA不完全的原因还是引物的原因。
PS：S1 第46位5'  CGAAAAATACACAGGGCACA  AT3'
R1  5'  ACAGGCTTATTTAATTTGGCAC 3'第1313位
希望高手们帮我分析一下，感激不尽！

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1楼 2010-03-15 10:06:06

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cxy3358519

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by cxy3358519 at 2010-03-15 10:06:06:
1 ctcctctctc cgccggcaac cttattggta tcaagaaaaa cttgtcgaaa aatacacagg
61 gcacaatgtg cggaggcgcc atcctcgcgg agctgatccc gccgacgcgg cgcgtggcgt
121 cgaagccggt gacagaaggc cacctctggt cggcgagc ...

请问一下二步法是什么？