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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 【求助】细胞冻存遇到的问题
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fyw921

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】细胞冻存遇到的问题

大家好。我的细胞冻存的时候放在液氮表面4d天后才放在液氮中请问大家对细胞有没有影响啊，谢谢！
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1楼 2010-03-15 09:09:14
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baiyalei163

铁虫 (小有名气)
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！ 2010-03-17 08:17
为什么要放在表面，不是先放在-70的么？如果表面也能达到-70，应该没问题，可在冻存 后一个月复苏试试看
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2楼2010-03-15 10:55:32
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ylcui

木虫 (著名写手)
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薰衣草儿(金币+1):版内奖励~ 2010-03-16 09:57
应该用程序降温仪或程序降温盒，不要按照国内编的细胞培养参考书那么做，是错误的。
实在没有，自己用泡沫塑料盒加上棉花做一个，也比液氮罐降温的错误方法好。
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3楼2010-03-15 22:51:45
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qingbo62

木虫 (正式写手)
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薰衣草儿(金币+1):同意~ 2010-03-16 09:57
引用回帖:
Originally posted by fyw921 at 2010-03-15 09:09:14:
大家好。我的细胞冻存的时候放在液氮表面4d天后才放在液氮中请问大家对细胞有没有影响啊，谢谢！

我记得以前看过一个图片，讲的是液氮罐各个部分的温度。
不过记得不清楚了。
液N2中-196，罐口大概是-100~-120，液N2上面怎么也有个-140~-150吧。要再去查一下。
细胞在-80还能保存个半年到一年没问题。在液N2上面放个四天应该问题不大吧。
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4楼2010-03-16 09:47:51
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薰衣草儿

荣誉版主 (知名作家)

♡花语の恋♡

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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！ 2010-03-17 08:18
引用回帖:
Originally posted by ylcui at 2010-03-15 22:51:45:
应该用程序降温仪或程序降温盒，不要按照国内编的细胞培养参考书那么做，是错误的。
实在没有，自己用泡沫塑料盒加上棉花做一个，也比液氮罐降温的错误方法好。

部分赞同，但是国内的书也是很多人的经验总结，在没有降温仪的情况下（多数都没有），还是有价值的吧~
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　　　　　．*　☆．☆°　*.　☆　☆‘‘　☆。　　　　　　☆☆。　　*°　‘‘☆　☆°*‘‘°'☆
5楼2010-03-16 09:58:35
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cam967

金虫 (著名写手)
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基本没问题， 缓冻速溶嘛！
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6楼2010-03-16 16:54:10
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ylcui

木虫 (著名写手)
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！ 2010-03-17 08:18
引用回帖:
Originally posted by 薰衣草儿 at 2010-03-16 09:58:35:

部分赞同，但是国内的书也是很多人的经验总结，在没有降温仪的情况下（多数都没有），还是有价值的吧~

这个方法冻存肿瘤细胞系一般没有问题，甚至放-70度冰箱都可以。但是做组织工程和生物材料研究多数用原代细胞，就很难成功了。
有时候细胞活了，但是许多指标性的蛋白不表达了，我们遇到过这样的问题。
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7楼2010-03-16 19:01:32
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baiyalei163

铁虫 (小有名气)
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chemist229(金币+1):欢迎交流！ 2010-03-18 14:29
没有高级货进行程序降温的话，我们是这样的，先4°一小时，然后-20°两小时左右，最后直接扔到-70°，也能保存个一年半载的
当然有写细胞株冻存后复苏效果不好，这个可能和细胞本身有关，也可能冻存条件要摸索一下，但是大差不差的
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8楼2010-03-17 09:54:45
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