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fyw921

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】细胞冻存遇到的问题

大家好。我的细胞冻存的时候放在液氮表面4d天后才放在液氮中请问大家对细胞有没有影响啊,谢谢!
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baiyalei163

铁虫 (小有名气)

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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论!!!! 2010-03-17 08:17
为什么要放在表面,不是先放在-70的么?如果表面也能达到-70,应该没问题,可在冻存 后一个月复苏试试看
2楼2010-03-15 10:55:32
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ylcui

木虫 (著名写手)

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薰衣草儿(金币+1):版内奖励~ 2010-03-16 09:57
应该用程序降温仪或程序降温盒,不要按照国内编的细胞培养参考书那么做,是错误的。
实在没有,自己用泡沫塑料盒加上棉花做一个,也比液氮罐降温的错误方法好。
3楼2010-03-15 22:51:45
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qingbo62

木虫 (正式写手)

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薰衣草儿(金币+1):同意~ 2010-03-16 09:57
引用回帖:
Originally posted by fyw921 at 2010-03-15 09:09:14:
大家好。我的细胞冻存的时候放在液氮表面4d天后才放在液氮中请问大家对细胞有没有影响啊,谢谢!

我记得以前看过一个图片,讲的是液氮罐各个部分的温度。
不过记得不清楚了。
液N2中-196,罐口大概是-100~-120,液N2上面怎么也有个-140~-150吧。要再去查一下。
细胞在-80还能保存个半年到一年没问题。在液N2上面放个四天应该问题不大吧。
4楼2010-03-16 09:47:51
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薰衣草儿

荣誉版主 (知名作家)

♡花语の恋♡

优秀版主

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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论!!!! 2010-03-17 08:18
引用回帖:
Originally posted by ylcui at 2010-03-15 22:51:45:
应该用程序降温仪或程序降温盒,不要按照国内编的细胞培养参考书那么做,是错误的。
实在没有,自己用泡沫塑料盒加上棉花做一个,也比液氮罐降温的错误方法好。

部分赞同,但是国内的书也是很多人的经验总结,在没有降温仪的情况下(多数都没有),还是有价值的吧~
     .* ☆.☆° *. ☆ ☆‘‘ ☆。      ☆☆。  *° ‘‘☆ ☆°*‘‘°'☆
5楼2010-03-16 09:58:35
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cam967

金虫 (著名写手)


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基本没问题, 缓冻速溶嘛!
6楼2010-03-16 16:54:10
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ylcui

木虫 (著名写手)

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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论!!!! 2010-03-17 08:18
引用回帖:
Originally posted by 薰衣草儿 at 2010-03-16 09:58:35:

部分赞同,但是国内的书也是很多人的经验总结,在没有降温仪的情况下(多数都没有),还是有价值的吧~

这个方法冻存肿瘤细胞系一般没有问题,甚至放-70度冰箱都可以。但是做组织工程和生物材料研究多数用原代细胞,就很难成功了。
有时候细胞活了,但是许多指标性的蛋白不表达了,我们遇到过这样的问题。
7楼2010-03-16 19:01:32
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baiyalei163

铁虫 (小有名气)

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chemist229(金币+1):欢迎交流! 2010-03-18 14:29
没有高级货进行程序降温的话,我们是这样的,先4°一小时,然后-20°两小时左右,最后直接扔到-70°,也能保存个一年半载的
当然有写细胞株冻存后复苏效果不好,这个可能和细胞本身有关,也可能冻存条件要摸索一下,但是大差不差的
8楼2010-03-17 09:54:45
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