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janepeng

[交流] 【求助】不同的酸浓度对HPLC 分离的影响?

最近我在做一个样品,分别用0.02%和0.05%的甲酸水和甲醇为流动相洗脱,发现分离效果差别很大,请问哪位高手说说什么原因?
我可不可用再高一点的酸做呢,实验结果发现0.05%甲酸分离效果好一些,另外我还想问甲酸最高可以加多少?
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429649057

木虫 (小有名气)

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佳怡(金币+2):3Q~ 2010-03-12 18:48
根据你试验的结果说明你的样品对系统的pH较敏感,系统酸度越强,分离效果越好。你可以针对你用的色谱柱对酸的的耐受限度来调整系统中酸的加入量,以便能将样品理想的检测出来。
4楼2010-03-12 13:05:00
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zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)

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佳怡(金币+1):3Q~ 2010-03-11 19:37
甲酸量同时要考虑流动相的PH不能超过色谱住的限度
2楼2010-03-11 17:43:58
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shuzhuang

金虫 (正式写手)

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佳怡(金币+1):3Q~ 2010-03-11 19:37
用这种缓冲溶液会得到较好的分离效果,但酸性过高会对柱子造成致命的损坏,一般柱子的PH限度2—12,但在4—8较稳定。你可以酌情调节甲酸浓度
爱自由
3楼2010-03-11 18:12:17
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yanan675

银虫 (小有名气)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-04-02 07:56
这说明你的样品成酸性,增强流动相的酸性可增强流动相得竞争力,从而使样品有很好的分离,至于甲酸最多加多少还是要看柱子对pH的承受能力
死机并不可怕,可怕的是没有存档!
5楼2010-04-01 21:02:27
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