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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】超声破碎问题
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zjwang

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】超声破碎问题

做蛋白纯化，超声破碎后过柱子。但是超声后效果不好，大家有什么好的经验，是不是加溶菌酶后效果好些？
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1楼 2010-03-11 11:36:13
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yqhc

金虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1): 2010-03-11 11:45
zjwang(金币+1):谢谢 2010-03-11 11:46
简单方法 冻融
可根据你的纯化方法-考虑盐渗透法。
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2楼2010-03-11 11:43:28
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zjwang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yqhc at 2010-03-11 11:43:28:
简单方法 冻融
可根据你的纯化方法-考虑盐渗透法。

能不能说的详细些？
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3楼2010-03-11 11:48:40
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missu

金虫 (小有名气)
★ ★
zjwang(金币+1): 2010-03-11 13:27
1949stone(金币+2): 2010-03-11 13:35
将菌体用你后续纯化用的Buffer重悬，-20℃冷冻后再融解，然后直接超声就行了。
-80℃的效果可能更好。溶菌酶也可以的，不过溶菌酶需要有EDTA效果才好，但EDTA会影响有些亲和层析……
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4楼2010-03-11 13:00:39
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