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Annel

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞冻存复苏后没阳性

请教各位高手,我的细胞寒假冻存了,冻存钱检测抗体是有阳性的,复苏以后再检测就没有阳性了,DMSO做冻存液,-80℃冻存,请问各位是怎么回事啊,谢谢了先
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beenomics

至尊木虫 (著名写手)

游戏人间的拙劣的造梦师


1949stone(金币+1): 2010-03-11 13:40
Annel(金币+3): 2010-03-12 11:02
估计是细胞没冻好,复苏的时候都死了...和阳性阴性没关系,可能
在深深的迷茫中徘徊
2楼2010-03-11 12:10:07
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Annel

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by Annel at 2010-03-11 09:21:38:
请教各位高手,我的细胞寒假冻存了,冻存钱检测抗体是有阳性的,复苏以后再检测就没有阳性了,DMSO做冻存液,-80℃冻存,请问各位是怎么回事啊,谢谢了先

谢谢你先,细胞没死,还长得很好,但就是没有阳性
3楼2010-03-12 11:02:34
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cheo163

金虫 (小有名气)

同问,我的也是这样。
细胞长得很正常,就是检测不到阳性了
4楼2010-03-12 11:24:10
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

Annel(金币+2): 2010-03-12 14:38
应激表达?
5楼2010-03-12 13:28:22
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Annel

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by cheo163 at 2010-03-12 11:24:10:
同问,我的也是这样。
细胞长得很正常,就是检测不到阳性了

不懂哦
6楼2010-03-12 14:38:09
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bzybzy203

新虫 (初入文坛)


1949stone(金币+1): 2010-03-14 11:28
重新亚克隆啦。冻存过程中可能阳性丢失了
7楼2010-03-12 17:59:22
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Annel

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by bzybzy203 at 2010-03-12 17:59:22:
重新亚克隆啦。冻存过程中可能阳性丢失了

为什么会出现这种情况呢,可能要重新融合咯,不过这个问题很严重啊,我重新融合重新检测,再冻存怎么办?再没有阳性怎么办?
8楼2010-03-14 11:26:36
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cheo163

金虫 (小有名气)

Annel(金币+5): 2010-03-19 12:42
我们做单抗的,这个问题经常会遇到啊,这是因为细胞株不稳定造成的,但你在融合后通常会留十株左右的阳性株亚克隆保存的啊,即使这株丢了,还可以复苏别的株的。
9楼2010-03-17 17:06:24
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cheo163

金虫 (小有名气)

至于复苏后就亚克隆我们试过,目前还没有用这种办法捡回阳性细胞株。
10楼2010-03-17 17:09:14
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