应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】怎么PCR克隆4500bp的DNA长片段
汕头大学海洋科学接受调剂
151/2返回列表12下一页
查看: 872  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yucheng9255

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】怎么PCR克隆4500bp的DNA长片段

想通过PCR设计引物克隆葡萄基因组DNA的4500bp的长片段，可资料上都写着，PCR克隆一般是2000bp, 4500bp是不是太长了，能PCR出来吗
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-10 23:10:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucheng9255

木虫 (著名写手)
希望大家给予帮助
赞一下 回复此楼
2楼2010-03-11 07:46:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-11 13:41
longtaq，首推takara的LA
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-03-11 08:22:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinsongna

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
支持3楼的  4500的用LA可以的
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-11 08:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

van0735

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-11 13:41
同意楼上的看法，可以先用takara的LongTaq酶试试，我以前用这个酶P过8000多的片段，但是这个酶的保真性不是很好，错配会很多，建议测序确保准确，祝楼主好运！
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-03-11 08:45:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

angel2536

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-11 13:41
一般高保真都可以，4500不是很长，pfu高保真就可以
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-03-11 09:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucheng9255

木虫 (著名写手)
谢谢各位虫虫的指点，我试试看
赞一下 回复此楼
7楼2010-03-11 12:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-11 13:41
4500克隆也不是很好做，建议选择载体时注意一下，另外连接时间要延长
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2010-03-11 12:53:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

missu

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-03-11 13:41
貌似PFU扩不了4500吧……
用Takara的Primer STAR，高保真又能扩长片段。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2010-03-11 12:56:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucheng9255

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-11 12:53:59:
4500克隆也不是很好做，建议选择载体时注意一下，另外连接时间要延长

选择载体怎么注意呢？希望指点一下
赞一下 回复此楼
10楼2010-03-11 13:37:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yucheng9255 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 279求调剂 +11 张番茄不炒蛋 2026-04-11 11/550 2026-04-13 22:25 by zhq0425
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 53/2650 2026-04-13 14:20 by 张zhihao
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen～
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 085500求调剂材料 +10 易11122 2026-04-09 10/500 2026-04-11 10:39 by maddjdld
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 266求调剂 +29 阳阳哇塞 2026-04-07 29/1450 2026-04-10 16:20 by 高维春
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 青岛科技大学材料学院，环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 277、学硕，求调剂 数一104， +11 瓶子PZ 2026-04-07 12/600 2026-04-07 23:30 by 一只好果子?
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭