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小猫三两只

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】GFP定位

做GFP定位时,要将目的基因插入到含有GFP的表达载体中,如果基因需插入到GFP前面,构建表达载体时是不是要将基因的终止密码子去掉,同理,如果连到GFP后面,是不是要将GFP的终止密码子去掉,在这两种情况下,目的基因和GFP的起始密码子有没有影响?
另外,在做GUS染色时,用不用考虑这种情况?
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Charlie1331

金虫 (正式写手)

要去掉的。T7只是启动强度太强,表达应当不稳定。
3楼2010-03-10 22:27:23
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-03-10 21:54
看启动子吧,强启动子的话,共表达的两个基因即使前面的一个有终止密码子,后面的也能表达的,比如T7就可以。
Thank-you,so-blue.
2楼2010-03-10 21:47:47
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段家一凡

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
去掉,不然不是融合蛋白了。也很有可能后面的不表达。
4楼2010-03-11 00:56:19
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