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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我这个怎么设计引物?

我的一个基因转到植物中后,PCR分子检测后,非转植物和转基因植物都有条带,老师说让我设计一个带35S启动子的引物,重新PCR。为什么这么做?要是这样做我需要知道哪些条件?
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
说明你的基因很可能是植物来源的,你的植物转基因前也有相应的同源序列,所以PCR都有带,用启动子的序列为引物做PCR鉴定的时候就可以避免这种情况发生了。

[ Last edited by susizheng on 2010-3-10 at 21:41 ]
Thank-you,so-blue.
2楼2010-03-10 21:38:22
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
在转基因的时候用到的质粒或载体中,含有植物体没有的序列,一端引物设计在植物没有的序列上可以避免同源基因的扩增吧。
jiayoubashaonian
3楼2010-03-10 22:26:05
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angel2536

金虫 (著名写手)

同意一楼的见解,启动子为了鉴定你的转基因是否成功
4楼2010-03-11 09:22:32
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

知道了。谢谢

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-03-10 21:38:22:
说明你的基因很可能是植物来源的,你的植物转基因前也有相应的同源序列,所以PCR都有带,用启动子的序列为引物做PCR鉴定的时候就可以避免这种情况发生了。

[ Last edited by susizheng on 2010-3-10 at 21:41 ...

知道了,谢谢!
5楼2010-03-11 10:48:35
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢!

引用回帖:
Originally posted by blackrose8089 at 2010-03-10 22:26:05:
在转基因的时候用到的质粒或载体中,含有植物体没有的序列,一端引物设计在植物没有的序列上可以避免同源基因的扩增吧。

那我设计引物时需要知道哪些序列?
6楼2010-03-11 10:50:22
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-03-10 21:38:22:
说明你的基因很可能是植物来源的,你的植物转基因前也有相应的同源序列,所以PCR都有带,用启动子的序列为引物做PCR鉴定的时候就可以避免这种情况发生了。

[ Last edited by susizheng on 2010-3-10 at 21:41 ...

那接下来我该怎么做呢?需要知道哪些序列?
7楼2010-03-11 10:51:12
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