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暖风1711

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酶活计算

求求哪位大虾费心帮忙看一下,这两天都被搞混了,越想越糊涂
   我测活体系是
10ul酶液(破碎上清)+485ul缓冲液+5ul底物反应十分钟之后,加入2ml 碳酸钠
标准曲线的测定体系与测活体系一样,算出来底物是5nmol/ml

我酶活定义是:一定条件下每生成1umol的底物所需要的酶量,10ul酶液的蛋白含量是29.86ug,
请哪位高手给解一下,给出详细过程,带着单位,因为这个也不是很明白,还有U/ml  和U/mg,是什么意思,胞外酶活怎么算的,
小女子在此跪谢
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★
1949stone(金币+2): 2010-03-09 20:43
暖风1711(金币+5): 2010-04-18 16:08
5nmol/ml=5*10-6 umol/ul
现在是10ul的酶液要与5*10-6 umol/ul 浓度的底物反应,那么对于1umol的底物应该需要酶液10ul除以5*10-6 umol/ul =2*10 6 (10的6次方),需要的蛋白量自然就可以算出来了么~

U/ml  和U/mg,是什么意思?
答:就是每毫升里面有多少单位酶量,以及每微克有多少酶量?

胞外酶如何计算在谷歌一搜就有了~
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2010-03-09 16:51:14
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


1949stone(金币+1): 2010-03-09 20:43
暖风1711(金币+5): 2010-04-18 16:09
因为胞外溶液成分复杂,而且蛋白质未经纯化,含有其它杂蛋白,所以溶液里的酶活力用多少单位每毫克蛋白来计算意义不大。即使在蛋白质纯化表中标示了,那也只是用于计算最后的纯化倍数而已。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2010-03-09 16:51:24
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