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猴子女士

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】活性污泥中蛋白质的提取方法

本人在做活性污泥絮体胞外聚合物分泌情况方面的研究。关于蛋白质的提取方法本人试过了3个,差别较大。1. 是文献中所报道的加热提取法,即在100摄氏度水浴中提取10分钟,结果蛋白质的浓度为400mg/L左右;2. 是参考文献中的甲醛-氢氧化钠提取法,10ml污泥中加36.5%甲醛0.06ml,搅拌1小时,再加4ml 1M氢氧化钠搅拌3h,测得蛋白质浓度为200mg/L左右;3. 是另外一篇文献中的甲醛-氢氧化钠提取法,氢氧化钠的浓度仅为0.04M, 测得蛋白质浓度为15mg/L。

需要说明的是,提取之前均未加缓冲液,但是检测样品的pH值为7左右。

各位虫友有没有自己认为比较可靠的蛋白质提取方法,请详细介绍一下!或者认为上述方法哪个数值比较可靠呢?谢谢了!
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hjgah

铁虫 (小有名气)


猴子女士(金币+1):谢谢参与
个人觉得水浴加热提取比较靠谱
2楼2010-03-08 18:20:59
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sky_pele

铁杆木虫 (著名写手)


猴子女士(金币+1):谢谢参与
蛋白裂解液,可以试试
3楼2010-03-08 21:28:19
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gaofeng925

版主 (知名作家)


猴子女士(金币+1):谢谢参与
加氢氧化钠会使蛋白质分解,个人觉得还是高温提取靠谱
4楼2010-03-09 08:20:27
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