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695木虫 (职业作家)
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[交流]
【求助/交流】原核表达问题
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| 最近在优化实验条件,37度4 h表达出特异带了,但是由于形成包涵体较多,所以想着从温度上加以优化,现在采用了25度12 h和16度 24 h两个处理。今天在超声破前,加入DTT,PMSF和sarcosyl后,25度的那个处理就好似是果冻状,离心后只有少量漂浮物,而且里边溶液还是黏糊的,而16度的处理很正常,超声波后有沉淀。于是怀疑25度的那个处理没有超声彻底,于是又做了一遍超声波,这次里边溶液倒是彻底清澈了,而且吹打也和利索,但是只见到了极少量的上清,实验结果没出来之前想和大家交流下,这种现象正常吗?还望大家指正出来,共同学习下,多谢了! |
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