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【求助/交流】膜蛋白分离中的两相分离(PEG/Dextran)的问题
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我现在在做膜蛋白方面的实验, 根据文献中的方法用PEG/Dextran两相分离 来进行膜组分的富集纯化。 不过最近2次做出来的结果都不理想 蛋白条带数很少 和文献对比后 觉得应该是我PEG/Dextran两相分离液的配制出现了问题。 在Jörg Reinders2009年的Proteomics_-_Methods_and_Protocols书中提到 To prepare the two-phase system, add 0.65 g of 6.5% PEG, 1.2 g of 6.5% dextran, and 1.15 g of phase dilution buffer to each culture tube. 在书中提到的药品中有 Twenty percent polyethylene glycol 3,350 (PEG) (Sigma). Forty percent dextran T500 (Sigma). 但在我购买的药品里面 PEG Dextran都是固体药品,也没有20% 40%的? 这个两相分离液到底应该怎么配制啊? 先谢谢各位了 |
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