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na_8337

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助:sds电泳的问题

毕业以后已经2年没有做过电泳了,由于工作需要又要重新做,实验条件有限,不像以前在学校那样有规律,遇到了一些以前从来没有遇到的问题,所以来此麻烦各位,请教一些目前实验遇到的麻烦。

我的试剂是由实验人员配的,应该不会有问题。AP原料是N年前购买的,但是性状没有问题(没有吸潮,其他能用的上的实验也在用这个),室温可能稍低一些(我把架子拿到高温烘箱的上面灌的,而且AP和TEMED都加大一倍量)。

1、胶是勉勉强强的凝了,可是不直,怀疑烘箱温度不均匀,或有点漏(在胶皮实验台上做胶版,每次都漏,太郁闷了,而实验室的试验台和窗台都有胶皮垫着)
2、多加AP和TEMED会不会使胶很脆啊?
3、跑出来效果歪歪扭扭,不是微笑,也不是皱眉,是什么原因啊?
4、染色过后如果有条带,肉眼能否看见?还是一片蓝色?
5、电泳时MARKER都没有条带,能是什么原因?


最希望有好心人能告诉我这方面专业人士群的Q号,因为实验的时候总遇到一些意想不到的问题,大大影响实验进度,拜托各位了。
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magic8502

金虫 (正式写手)

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1949stone(金币+1): 2010-03-03 23:39
如果连marker都没有带,那肯定是胶的问题。可能是试剂出了问题,建议你最好了解下实验人员是怎么配的哦
灌胶前将溶液充分搅匀了
胶凝不好,上样孔不完整也有可能导致条带不好看
方向比努力重要,能力比知识重要,健康比成绩重要,生活比文凭重要,EQ比IQ重要。
2楼2010-03-03 10:03:07
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jasco

木虫 (正式写手)

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1949stone(金币+1): 2010-03-03 23:39
1.AP新购买吧
2.ap多加胶会脆,temed多加只是凝的快
3.胶不均匀,
4.考染出来时一片蓝色,肉眼一般不可见条带
5.marker是不是降解了?要不就是胶的问题
3楼2010-03-03 10:09:23
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