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【求助/交流】还原糖含量的测定
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| 还原糖含量的测定有许多方法，如Nelson方法，铁氰化钾的方法，这些方法有什么差别，哪个比较好些，希望各位大侠帮帮忙！ |
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2楼2010-03-01 21:23:47
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amisking(金币+5): 2010-03-01 21:48
amisking(金币+5): 2010-03-01 21:48
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实验一 3，5-二硝基水杨酸比色定糖法 目的要求 1.掌握 3，5-二硝基水杨酸比色法定糖的原理及方法。 2.用 3，5-二硝基水杨酸定糖法测定山芋份中的总糖度及还原糖。 3.熟悉 721型分光光度计的原理及使用方法。 实验类型：验证型 原理 3， 5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈比例关系，利用比色法可测知样品的含糖量。该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰较少。 操作方法 一、葡萄糖标准曲线的制定 取9支大试管，分别按下表顺序加入各种试剂： 将上述各管溶液混匀后，在721分光光度计上用520纳米进行比色测定，用空白管溶液调零点。记录光吸收值。以葡萄糖浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标绘制出标准曲线。 二、山芋粉中总糖和还原糖含量的测定 1.样品中还原糖的提取：准确称取2克山芋粉，放入100毫升烧杯内，加入85%乙醇50毫升，混匀，在50℃恒温水浴中保温30分钟，过滤，滤渣再用85%乙醇提取二次。将滤液合并，蒸去乙醇，加少量水，移入100毫升容量瓶中，用水稀释到刻度，备用。 2.样品中总糖的水解及提取：准确称取山芋粉1克，放入大试管中，加入10毫升6N盐酸和15毫升蒸馏水。混均，在沸水浴中加热半小时后，用碘化钾-碘溶液检查水解程度。若已水解完全，则不呈现蓝色。冷却后加入酚酞指示剂1滴，以10%氢氧化钠中和至溶液呈微红色。过滤并定容至100毫升。再精确吸取上述溶液10毫升，放人100毫升容量瓶中，稀释刻刻度，备用。 3.样品中含糖量的测定：取7支大试管，分别按下表加入各种试剂： 将各管混匀后，按制作标准曲线时同样的操作测定各管的光密度，在标准曲线上查出相应的还原糖含量，按下述公式计算出山芋粉内还原糖与总糖的百分含量。 试剂和器材 一 、试剂 （1）3，5-二硝基水杨酸试剂 （又称DNS试剂）： 甲液：溶解6.9克结晶酚于15.2毫升IO%氢氧化钠中，并稀释至69毫升，在此溶液中加入6.9克亚硫酸氢钠。 乙液：称取255克酒石酸钠，加到300毫升10%氢氧化钠中，再加入880毫升1%3，5-二硝基水杨酸溶液。 将甲液与乙液相混合即得黄色试剂，贮于棕色试剂瓶中。在室温下，放置7—10天以后使用。 （2）0.1%葡萄糖标准液：准确称取100毫克分析纯的葡萄糖（预先在105℃干燥至恒重），用少量蒸馏水溶解后定容至100毫升，冰箱保存备用。 （3）6N盐酸溶液。 （4）10%氢氧化钠溶液。 （5）碘化钾-碘溶液（碘试剂）。 （6）酚酞指示剂。 （7）85%乙醇。 二、器材 （1）试管和试管架。 （2）碱滴定管（50毫升）。 （3）铁台。 （4）滴定管夹。 （5）吸量管（1毫升和2毫升）。 （6）容量瓶（100毫升）。 （7）铜水浴锅。 （7）玻璃漏斗和烧杯。 （9）铁三脚架。 （10）量筒（10毫升、100毫升）。 （11）电热恒温水浴。 （12）煤气灯。 （13）玻璃棒。 （14）白瓷板。 （15）721分光光度计 思考题 1.比色测定的操作要点是什么？基本原理是什么？ 2.721型分光光度计的原理及使用时的注意事项是什么？ 3.比色测定时为什么要设计空白管？ 4.总糖包括哪些化合物？ |
3楼2010-03-01 21:25:21
4楼2010-03-01 21:27:17
zhouzhou_3006
木虫 (著名写手)
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5楼2010-03-03 15:04:08
