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日珥1117

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于C2C12细胞诱导肌管的问题

我最近在做C2C12细胞诱导肌管的实验,之前查过的一些文献上说C2C12细胞长到80%-90%的密度时换2%马血清,一般3-4天就能分化成肌管,可是我试了几次都没有成功,现在想请教各位大虾以下几个问题:
1、马血清灭活:我们用的是GIBCO的马血清(Horse Serum),没有热灭活的那种,这个血清灭活与不灭活对诱导会有什么影响么?
2、细胞密度:我也用完全长满的一盘诱导过,但是换成马血清后原本长满的细胞中间就出现好多没有细胞的区域,然后细胞大片漂起来,肉眼可见一片一片白色的像薄膜一样的东西?细胞密度究竟要达到什么状态?
3、细胞状态:什么样的状态才是诱导肌管的最佳状态呢?
目前我能想到的可能产生影响的问题就是这样,还请各位有经验的大虾们多给宝贵意见和建议,真的真的非常感谢!!!
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日珥1117

新虫 (初入文坛)

没有回复……自己帮自己顶一下
2楼2010-02-03 00:19:51
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地图蜗牛

银虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵,我正好做过。
1. 我也没有灭活马血清,但是还是诱导成功了。
2. 细胞密度,我在70-80%时诱导过,在铺满时诱导过,都可以的。没有遇到过细胞成片脱落培养瓶或培养皿的情况。
3. 诱导前和诱导后都是每天换液,C2C12长得实在太快。

好像也不一定解决你的问题,祝好运。
3楼2010-02-03 05:27:48
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