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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】请教关于细胞培养液上HPLC的问题
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vanilla2334

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】请教关于细胞培养液上HPLC的问题

我的工作内容是：做了抗肿瘤药物试验的肺癌细胞培养液（用的是1640培养基），将培养液上HPLC经行分析，柱子用的是C18。我发现培养液中加入了甲醇后液体变得浑浊，这样肯定会堵柱子的，怎么办啊？我该怎么处理这种培养液？请求大家帮帮我！
    不胜感激！
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1楼 2010-01-30 13:37:34
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guoyayun40

铁杆木虫 (正式写手)
vanilla2334(金币+1): 2010-01-30 14:16
vanilla2334(金币+1): 2010-01-30 14:56
vanilla2334(金币+1): 2010-03-04 15:55
那就加点纯水试试，变浑浊后肯定不能进柱子的
或者过滤一下试试
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2楼2010-01-30 14:01:03
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vanilla2334

新虫 (初入文坛)
[quote]Originally posted by guoyayun40 at 2010-01-30 14:01:03:
那就加点纯水试试，变浑浊后肯定不能进柱子的
或者过滤一下试试 [/quo谢谢你，但是我的流动相是甲醇和水，所以我希望能处理为在甲醇中不会浑浊的状态
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3楼2010-01-30 14:17:57
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vanilla2334

新虫 (初入文坛)
请各位做过类似东西的朋友们帮帮我啊！
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4楼2010-01-30 15:08:14
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vanilla2334

新虫 (初入文坛)
5楼2010-01-30 15:09:18
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
vanilla2334(金币+1): 2010-02-04 22:04
vanilla2334(金币+1): 2010-03-04 15:55
引用回帖:
Originally posted by vanilla2334 at 2010-01-30 13:37:34:
我的工作内容是：做了抗肿瘤药物试验的肺癌细胞培养液（用的是1640培养基），将培养液上HPLC经行分析，柱子用的是C18。我发现培养液中加入了甲醇后液体变得浑浊，这样肯定会堵柱子的，怎么办啊？我该怎么处理这种 ...

稍微过滤下怎么样呢？
也可以放置在样品瓶中沉底，小心吸取上层清夜！
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我为新生
6楼2010-01-30 15:53:30
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kitsao

金虫 (正式写手)
★
wingcat(金币+1):谢谢 2010-02-11 10:00
vanilla2334(金币+1): 2010-03-04 15:54
引用回帖:
Originally posted by vanilla2334 at 2010-01-30 13:37:34:
我的工作内容是：做了抗肿瘤药物试验的肺癌细胞培养液（用的是1640培养基），将培养液上HPLC经行分析，柱子用的是C18。我发现培养液中加入了甲醇后液体变得浑浊，这样肯定会堵柱子的，怎么办啊？我该怎么处理这种 ...

用甲醇+水试试呢，如果不浑浊，就提前混合好用一个泵好了
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7楼2010-02-05 21:42:16
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smilexu

金虫 (小有名气)
vanilla2334(金币+1): 2010-03-04 15:54
vanilla2334(金币+1): 2010-03-04 15:54
可以考虑加点丙酮试试看，看可能改善相容性。
要不看看离心可能解决问题！
我异想天开的说的啊！哈哈！
引用回帖:
Originally posted by vanilla2334 at 2010-01-30 13:37:34:
我的工作内容是：做了抗肿瘤药物试验的肺癌细胞培养液（用的是1640培养基），将培养液上HPLC经行分析，柱子用的是C18。我发现培养液中加入了甲醇后液体变得浑浊，这样肯定会堵柱子的，怎么办啊？我该怎么处理这种 ...

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8楼2010-02-10 14:16:16
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zhangsibao

木虫 (正式写手)
★
wingcat(金币+1):谢谢 2010-02-11 10:00
vanilla2334(金币+1): 2010-03-04 15:54
个人认为可以从两个方面原因：
一、是否是甲醇氧化为甲醛造成蛋白变性形成的浑浊。
二、甲醇中的溶解性不良造成的。可以适当加水来试验。
至于做色谱建议离心分离、固相萃取过滤，并且在色谱柱之前加保护柱。
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9楼2010-02-10 14:21:19
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