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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电泳
汕头大学海洋科学接受调剂
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dacong406

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】电泳

1.请问SDS-PAGE电极缓冲液的配方，其中10X 5X 是10倍 5倍的意思吗？ 用前还要稀释吗？
2.样品用上样缓冲液处理后，能放置多久还能用呢？
谢谢各位
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1楼 2010-01-30 09:46:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-01-30 14:11
使用浓度应该是1倍，10倍意思是9份体积的其它溶液与一份体积的10倍液混匀成使用浓度。这在制作电泳胶中很常见，其它成分加起来再加上10倍的液体，剩余体积可以用别的液体来补足，比如双蒸水。

我喜欢放-20度，不喜欢放4度。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-01-30 14:07:43
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gaozx123

金虫 (小有名气)
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amisking(金币+2): 2010-01-30 14:10
是10倍，5倍的意思，不过你只需要用的时候把它终浓度定下来就行了。
加过上样缓冲液后最好不要放置太长时间，4°C最好不要超过一天。
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2楼2010-01-30 10:00:11
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夏末

铜虫 (小有名气)
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amisking(金币+2): 2010-01-30 14:11
楼上说得对，补充一下，如果样品用样品缓冲液处理之后还想长时间保存，可以冷冻起来，-20度，个把月没有问题，用之前先100度加热3min
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爱国爱家爱实验 看雨看雪看文献
3楼2010-01-30 12:15:56
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)
★
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10×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE电泳缓冲液），其组份浓度分别是0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5%（W/V）SDS。
                            配制量       1L
                            配制方法     1.  称量下列试剂，置于1L烧杯中
                            Tris        30.2g
                            Glycine        188g
                            SDS        10g
                                            2.  加入约800ml的去离子水，搅拌溶解
                                            3.  加去离子水将溶液定容至1L后，室温保存  
这个是10*的配方，你在电泳前要稀释成1倍，比如说你最终定容到1L的1*缓冲液，你可以加入10*的buffer100ml，再加900ml的ddw，这样就配成了1L的1*buffer了。

样品经过上样缓冲液的处理之后的存放时间，我个人实验的经验是，在4°下不要超过一天吧，不然会影响实验效果。
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看的开才是真本事~
6楼2010-02-09 18:25:28
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