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雨中蜗牛

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】细胞转染

我最近要杆状病毒表达,用Cellfectin Ⅱ Reagent 转染pEGFP-N1 ,可总也转不进去,有那位高手帮忙指点一下!
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■如果如果有一天?k忘記了沵爾一定要記得曾經有一個傻孩子?圻^爾
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雨中蜗牛

金虫 (正式写手)

没有人知道啊?我要转的是SF9细胞,转了好几次了,总也转不进去,也换了几种转染试剂了,还是不行!
■如果如果有一天?k忘記了沵爾一定要記得曾經有一個傻孩子?圻^爾
2楼2010-01-29 08:57:44
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gaozx123

金虫 (小有名气)

雨中蜗牛(金币+1): 2010-01-29 09:44
雨中蜗牛(金币+1): 2010-03-01 21:00
这个本来老板是要我做的,可是后来不知道什么原因,没有做成。不过老板说SF9细胞很好转的,尽管我没有做过,但是有些资料你可以看一下,这也只是我上网搜的,你参考一下吧。
http://bbs.labscn.com/showtopic-50186.html
http://bbs.bioon.com/bbs/viewthread.php?tid=231444
3楼2010-01-29 09:38:35
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qwhuagongda

银虫 (正式写手)

雨中蜗牛(金币+1):我都转好几遍了,我们老师也转不进去,也分析不出原因 2010-01-29 16:42
雨中蜗牛(金币+1): 2010-03-01 21:00
你用的细胞和质粒应该都很好转的,按试剂说明书操作就行了,只是操作上要注意一点,尤其是滴板要小心,防止脂质体和DNA的复合物被破坏。
4楼2010-01-29 16:36:55
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qwhuagongda

银虫 (正式写手)

雨中蜗牛(金币+1): 2010-01-29 18:17
雨中蜗牛(金币+1): 2010-03-01 21:00
我以前转过一个带EGFP基因的质粒,约有6.4kb,也是转了好多次才成功的。我感觉最重要的就是转染时要小心点,另外转染4-6小时后可以换成完全培养基,不知你用的是什么转染试剂,我以前用的是lipo2000,感觉还不错。
5楼2010-01-29 17:15:35
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雨中蜗牛

金虫 (正式写手)

我在三个小时后换的液,时间短啊?
■如果如果有一天?k忘記了沵爾一定要記得曾經有一個傻孩子?圻^爾
6楼2010-01-29 18:18:29
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lansha8331

无虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换威格拉斯的转染试剂VigoFect,非脂质体阳离子类的,效率高,毒性低,还可以带血清双抗,比脂质体的好用
7楼2010-03-18 11:14:17
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