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yang0071

木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by zjwang at 2010-01-28 18:11:51:
用gst抗体检测的,目的蛋白大约77k,加上gst差不多103k。像你说的空间构象覆盖gst抗体识别区几率有多大?没有目的蛋白的特异抗体。这个蛋白诱导后想过柱子纯化,这样western检测不出来不知道能不能过柱子。

几率这个东西还真不好说,
但是western检测不出来,gst都结合不上,过gst柱子肯定是不行的
11楼2010-01-28 18:17:34
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yang0071

木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by towindflower at 2010-01-28 18:51:53:

看你用的什么抗体了,而且肉眼都能看到的条带还需要做western?
如果用的抗体正确那就可能有两个原因:1.western 不过关,2.蛋白表达错了

1  lz的对照有条带
2  即使蛋白表达错了,只要连在gst上,gst抗体还是能识别的,除非识别区域被遮盖
12楼2010-01-28 18:20:28
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towindflower

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2010-01-28 18:20:28:

1  lz的对照有条带
2  即使蛋白表达错了,只要连在gst上,gst抗体还是能识别的,除非识别区域被遮盖

1.没看到楼主那句话里提到wstern做出对照了
2.SDS-PAGE变性胶不存在所谓的识别区域被掩盖
13楼2010-02-02 12:16:57
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)

是不是一抗没有结合上去啊?
看的开才是真本事~
14楼2010-02-09 18:36:35
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