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jackiechan

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何在引物设计时增加限制性酶切位点

请问,如何在引物设计时增加限制性酶切位点,谢谢赐教
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 1-27 18:45
在5‘端加上你要加的酶切位点和保护碱基就行了。
2楼2010-01-27 18:05:52
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jackiechan

木虫 (小有名气)

ллzhuifeng7000
3楼2010-01-27 18:24:04
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sailormoon8623


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
注意还要加保护碱基和切割效率
4楼2010-01-27 20:22:55
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towindflower

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by jackiechan at 2010-01-27 17:57:22:
请问,如何在引物设计时增加限制性酶切位点,谢谢赐教

NEB有研究不同长度保护碱基的切割效率的图表,可以参考
5楼2010-01-27 21:47:24
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jAnmee

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
真是太牛了… 俺初入此行
国荣,家驹,MJ,为什么我喜欢的恩都死了。。。。
6楼2010-01-28 03:47:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
NEB那个表已经过时,看Fermentas的
http://www.fermentas.com/en/supp ... cleavage-efficiency
7楼2010-01-28 09:19:01
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yangjunzju

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
加酶切位点和保护碱基是没错,但是保护碱基应该加哪些呢?有何规则?
8楼2010-01-28 15:15:07
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superboring

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
invitrogen or idtdna primer design program can add RE sites as request
9楼2010-01-29 06:40:43
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qwhuagongda

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
TAKARA的产品目录上就有保护性碱基的图,一般在酶切位点外加2-3个保护性碱基,但个人认为不必完全按照该图加保护性碱基,还要考虑引物本身的情况。
10楼2010-01-29 16:47:59
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