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baojunboy04

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[交流] 【求助/交流】荧光引物如何设计，请指教

荧光引物如何设计，请指教

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1楼 2010-01-27 12:45:45

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steffi12

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8.5
帖子: 8
在线: 43分钟
虫号: 553049
注册: 2008-05-02
专业: 生物

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

荧光定量引物有2种，一种是SYBR GreenI 染料实验；一种是TaqMan Probe法另外还有TAKARA公司的cycling Probe法不知道你说的是哪种

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2楼2010-01-27 13:31:16

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steffi12

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8.5
帖子: 8
在线: 43分钟
虫号: 553049
注册: 2008-05-02
专业: 生物

如果你使用SYBR gree I法，引物设计关键有3点：
1Tm值 GC含量范围
2引物内部、上下游引物之间没有互补序列
3不存在与模板的错配

一些公司会提供免费的引物设计比如TAKARA和金斯瑞，另外金斯瑞有在线荧光定量PCR引物设计软件可供免费使用
http://www.genscript.com.cn/Real ... _Primer_Design.html

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3楼2010-01-27 13:35:09

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qqsvery

木虫 (著名写手)

应助: 0 (幼儿园)
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红花: 3
帖子: 1688
在线: 18.6小时
虫号: 592166
注册: 2008-09-03
专业: 造血、造血调控与造血微环

引用回帖:

Originally posted by steffi12 at 2010-01-27 13:35:09:
如果你使用SYBR gree I法，引物设计关键有3点：
1Tm值 GC含量范围
2引物内部、上下游引物之间没有互补序列
3不存在与模板的错配

一些公司会提供免费的引物设计比如TAKARA和金斯瑞，另外金斯瑞有在线荧光定 ...

再添加一个real-time PCR引物设计的网站：
http://medgen.ugent.be/rtprimerdb/

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谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。

4楼2010-01-27 14:28:34

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