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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】高效液相色谱反相柱流动相问题
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muchong5577

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】高效液相色谱反相柱流动相问题

准备做个HPLC看某个反应有产物、产物是什么。
不知道产物具体什么，但推断有可能是：



请问大家，用什么流动相好呢。谢谢！

[ Last edited by muchong5577 on 2010-1-25 at 21:06 ]
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1楼2010-01-25 20:37:11
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muchong5577

金虫 (正式写手)
反应后底物和产物没有进行分离，底物是1.6--二羟基萘酚
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4楼2010-01-27 01:42:25
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muchong5577

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hugang2004_2000 at 2010-01-27 09:54:22:

极性差得比较大，应该好分离吧，随便找个浓度的甲醇水估计就能分开，不过几个成分的极性都比较小，所以前提是你的样品在甲醇水中能溶解，上样前记得过滤，甲醇比例大点，含1%醋酸的70-80%甲醇应该就差不多吧。

昨天下午我用80%的甲醇跑了一次反相，出的峰与对照是一样的，而且都是单峰，但峰尖一个又小又矮，一个又大又高。
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6楼2010-01-27 10:18:11
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muchong5577

金虫 (正式写手)
对照就是把酶煮沸失活，然后加入反应物，温育数小时。
还有一个底物是几个C 的烯，这个东西在225nm处不会有吸收峰的。
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8楼2010-01-27 14:07:13
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muchong5577

金虫 (正式写手)
嗯 ， 可能是酶复性没成功。
但还是不死心啊，换个条件。。。还要做次色谱看看。
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10楼2010-01-27 23:40:53
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muchong5577

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hugang2004_2000 at 2010-01-28 00:24:34:

能问一下你做的这个酶是什么酶吗？貌似功能很特殊啊！
你说的一个底物是1.6--二羟基萘酚，那如果你的推断产物结构对的话，岂不是你的这个酶具有在4位碳上加两个异戊烯基的功能啊？ 这样的功能很少见吧？

这个酶就是催化反应使之加上异戊烯基的啊。
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12楼2010-01-28 17:29:09
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