24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 735  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ashao

银虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】请问高盐洗脱的时候,对于不同的蛋白质其效果差别大么?

谢谢
就是2M的KCl的buffer
洗脱树脂上的蛋白的时候
如果树脂上有不同的蛋白
比如分子量不同、大小不同、疏水性等不同
其洗脱的时候是不是效果也不同?
换句话说
能否实现通过控制buffer(仅浓度,不pH)
来实现目标蛋白的洗脱(富集)?谢谢指教
ps
如果既浓度、又pH是否是实现该解吸呢?谢谢

[ Last edited by ashao on 2010-1-25 at 16:55 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


ashao(金币+1):谢谢参与
ashao(金币+1):谢谢关注 2010-02-05 23:17
富集是不大可能的了,因为上柱之前要的样品体积就不大,洗脱的时候是要收集需要的流分,这个流分也是有体积的,往往还增大了。

不同的蛋白质效果肯定是不同的了,但是有些蛋白质可能疏水性质差不多,这就需要利用分子量之类的性质不同来做进一步纯化了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2010-01-30 14:12:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

snoopyzxx

木虫 (著名写手)


ashao(金币+1):谢谢参与
ashao(金币+1):谢谢关注新年快乐 2010-02-11 15:09
离子交换树脂可以用盐浓度梯度达到洗脱的效果。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
4楼2010-01-29 20:45:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashao

银虫 (著名写手)

小结一下——
对于高盐洗脱,其实质是“对于离子交换树脂来说,其电荷和物质具有电荷吸引的作用;当加入更高例子浓度的盐时,这种电荷作用会被额外加入的盐离子破坏,进而破坏这种吸附,最终实现洗脱物质。”
蛋白质也是一样,因为其多种氨基酸也是有电荷的,并使得总蛋白带有电荷。
本话题中,想讨论的是如果仅仅凭借洗脱时候盐离子的浓度来实现不同蛋白质的先后洗脱。个人认为可行性不大——
因为破坏这种作用,用的是浓度很高的盐离子。即使在破坏电荷的过程中出现一些拐点或者过渡状态,也难以控制哪种蛋白质先后下来,而且只有在蛋白质电荷相差很大的情况下才可能先后下来。——总之,可行性不大,意义也不大。
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2010-01-30 14:12:21:
富集是不大可能的了,因为上柱之前要的样品体积就不大,洗脱的时候是要收集需要的流分,这个流分也是有体积的,往往还增大了。

不同的蛋白质效果肯定是不同的了,但是有些蛋白质可能疏水性质差不多,这就需要利 ...

6楼2010-02-11 15:27:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学求调剂 +6 RussHu 2026-04-12 7/350 2026-04-14 15:16 by sxdj2
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 08工学 309分求调剂 +11 Yin DY 2026-04-08 11/550 2026-04-14 12:55 by fqwang
[考研] 材料工程085601,270求调剂 +41 @ASDF1234 2026-04-08 44/2200 2026-04-14 09:23 by barlinike
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 346,工科0854求调剂,专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 287求调剂 +15 Fnhc 2026-04-07 21/1050 2026-04-10 19:09 by chemisry
[考研] 085404,285分求调剂 +12 薇薇考研 2026-04-07 14/700 2026-04-09 23:10 by parmtree
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 生物学学硕,初试351分,求调剂 +4 …~、王…~ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
信息提示
请填处理意见