24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 809  |  回复: 19
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我的Hela莫名的死了,请赐教

本新虫刚开始养细胞,养的第一个细胞是大家说的很好养的Hela,由于本实验室没有,所以找别的实验室要了,有两个途径的来源,但是都长得不好

1、找别的实验室师姐传了一瓶给我,刚拿来的时候那个漂亮,可是传了两代以后细胞就不贴了,漂浮着死了,因为是星期五传的,周末都不在实验室,拜托师姐换液,师姐说周六就漂着了所以就拿出了培养箱,具体情况我不是很清楚。今天早上我把培养瓶放到显微镜下观察了一下,发现是很多的漂在上面,但是下面有比较大的细胞近乎圆形贴在瓶上,我在想是不是当时本来有贴着的只是少,所以把培养瓶拿出来直立的放着是不是是本来贴的细胞没有了培养基而死了

2、找另外一个实验室要的细胞是冻存细胞,复苏以后用的是小的细胞培养皿(加2ml培养基就可以了)养,已经有一个星期了还没有传过一次代,细胞状态也不好,刚开始的时候有很多种形状,今早看的时候有点奇怪的是细胞在一片区域内好像分裂比较旺盛(一团细胞成圆形),很挤的感觉,但是板子没有铺满,还有很多地方时空的,我想把它消化一下重新培养不知道可不可以

注:我用的培养基是进口瓶装的DMEM,血清是国产的新生牛血清
?:第二种来源的细胞,他们说他们用的是1640培养基,我很疑惑

请高手赐教!!!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fwks3518

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by cavafory at 2010-01-25 12:51:23:
本新虫刚开始养细胞,养的第一个细胞是大家说的很好养的Hela,由于本实验室没有,所以找别的实验室要了,有两个途径的来源,但是都长得不好

1、找别的实验室师姐传了一瓶给我,刚拿来的时候那个漂亮,可是传了 ...

如果养了一个星期还没有长满,观察一下培养液的状态。DMEM一般有酚红作为酸碱指示剂,颜色偏黄表示偏酸,颜色偏紫表示偏碱。正常颜色应该是比较清亮的红色(带一点点的橙红),如果养了一个星期了还没长满,培养液不知道是否变浑浊或者ph发生了改变,可以不用消化,直接倒掉旧培养基,换上新培养液即可。
16楼2010-01-25 22:43:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

李彦辉

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+2): 1-25 16:18
培养基酸碱度,双抗,培养箱的二氧化碳含量,周边环境细胞状态是否有污染都是考虑因素
3楼2010-01-25 14:48:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by bigbangrex at 2010-01-25 14:45:51:
1640的就可以了

我用的DMEM 不可以吗?1640不是适合悬浮细胞的吗?
4楼2010-01-25 15:16:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 李彦辉 at 2010-01-25 14:48:53:
培养基酸碱度,双抗,培养箱的二氧化碳含量,周边环境细胞状态是否有污染都是考虑因素

培养基是进口的,二氧化碳5%,我的细胞本就没有污染,拿出来放了两天还没有污染,别人的细胞也没有污染,不是污染问题
我没有加双抗
5楼2010-01-25 15:20:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 312求调剂 +9 门路摸摸 2026-04-14 9/450 2026-04-14 11:12 by zhy10sdust
[考研] 求助调剂,跨调 +16 X十甫寸Y 2026-04-11 17/850 2026-04-14 10:59 by 不我拉绿卡
[考研] 08工学 309分求调剂 +10 Yin DY 2026-04-08 10/500 2026-04-14 10:56 by 不我拉绿卡
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +5 喽哈加油 2026-04-13 5/250 2026-04-14 10:15 by 求调剂zz
[考研] 本科郑州大学,一志愿华东师范大学282求调剂 +28 熊哥xtk 2026-04-07 33/1650 2026-04-13 17:48 by 邹gv
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-12 13/650 2026-04-13 17:32 by 长弓傲
[考研] 211本科材料化工求调剂 +17 YHLAH 2026-04-11 20/1000 2026-04-13 08:46 by Sammy2
[考研] 求调剂288 +7 ioodiiij 2026-04-10 9/450 2026-04-13 08:33 by Hayaay
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 287求调剂 +15 Fnhc 2026-04-07 21/1050 2026-04-10 19:09 by chemisry
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
信息提示
请填处理意见