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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于western blot的一抗
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fansyy

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于western blot的一抗

现在做某一蛋白的werstern blot，需要用一抗，一抗从哪里来呢，是不是公司有现成的可以买到啊，如果买不到要自己制作吧，大约需要多长时间做成？

新手，不了解。谢谢各位！
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1楼 2010-01-25 10:04:34
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李彦辉

铜虫 (正式写手)
★ ★
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司马诸葛(金币+1): 1-25 14:46
公司可以买，如果自己做耗时长，而且也需要有原本相应一抗来做。现在一抗很普遍。sigma，satacruz，等公司都有比较好的抗体
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2楼2010-01-25 10:25:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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司马诸葛(金币+1): 1-25 14:46
Santa Cruz的抗体是最多的
其他公司还有CST、Abcam、Chemicon、BD、R&D等
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3楼2010-01-25 13:15:59
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wylsunny

木虫 (小有名气)
★
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另外可以买国内分装的，省钱。
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4楼2010-02-05 20:13:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
国内分装一点都不省钱，而且还得冒质量的风险
算回那么多体积的话，比直接进口的贵
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5楼2010-02-05 20:52:48
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你可以尝试自己去做，问题在于你要能得到一个比较纯的目的蛋白，这样去免疫动物得到的一抗才比较好，即使你交给公司去做，他们的前提也是要你能提供一个较纯的目的蛋白，或者你提供编码这个目的蛋白的相关序列让公司自己合成。得到好的一抗之后，你要考虑这一抗的来源来选择合适的二抗~
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看的开才是真本事~
6楼2010-02-09 10:15:15
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1110rainjob

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先就是查你这个蛋白的一抗是否已经公司在出售的了，市售的抗体一般实验结果稳定而且效价较高，特异性较好；如果实在没有，那就只好自己制备了，如果你这个特异性要求不是特别高的话，可以做多抗，直接免疫兔子，然后提取血清。免疫兔子制备血清的方法网上很容易查到，制备好血清后检测效价，根据效价高低确定用量。因为自制的抗体不是酶标的，因此你需要再买一个抗兔的酶标抗体。
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7楼2010-02-09 12:50:25
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