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gydgs033

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物跑胶出现虚影

如题:最近PCR产物跑胶总是出现虚影,请教达人
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xiaozi2964

金虫 (正式写手)

★
gydgs033(金币+1):谢谢参与
引物加的过多,跑出来的是引物2聚体。
2楼2010-01-21 12:07:52
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★
gydgs033(金币+1):谢谢参与
发图上来看看
3楼2010-01-21 12:17:13
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沙中清泉

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
在主带两侧可能会有一些非特异性扩增
4楼2010-01-21 21:20:03
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feng509

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
条带下侧应该就是引物二聚体了,并且应该在最下方,因为比较短
爱,起于微笑,浓于亲吻,逝于泪水
5楼2010-01-21 23:04:47
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gaozx123

金虫 (小有名气)

目的条带出现虚影吗?之前没有出现过吧。我曾经出现过这种情况,原因是胶没有化好,不均匀,把胶多打几次,换新鲜的电泳液就OK了。
6楼2010-01-22 08:30:07
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by gaozx123 at 2010-1-22 08:30:
目的条带出现虚影吗?之前没有出现过吧。我曾经出现过这种情况,原因是胶没有化好,不均匀,把胶多打几次,换新鲜的电泳液就OK了。

同意楼上,最大的可能是胶的问题,如果重复之后还有问题,提高一下退火温度试试
7楼2010-01-22 09:47:28
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xrr1988

金虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是非特异性扩增,或者你调整下焦距看看
8楼2010-01-22 11:26:13
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

有可能是照相的问题!
梦在路就在!
9楼2010-01-22 13:26:29
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gydgs033

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gaozx123 at 2010-1-22 08:30:
目的条带出现虚影吗?之前没有出现过吧。我曾经出现过这种情况,原因是胶没有化好,不均匀,把胶多打几次,换新鲜的电泳液就OK了。

是目的条带出现虚影,我的电泳液每次都是用新的,再请教一下,如何判断胶化没化好呢,我差不多每次都是加热搅拌到固体全溶,然后等胶凉一凉,再倒
10楼2010-01-22 18:55:30
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