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boulevard

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】我的载体为何只表达了标签蛋白?

最近做表达,把1300bp构建到pGEX-4T-1中,invitrogen公司测序结果没有问题,密码子没有移位,在Rosseta(DE3)表达,拿空载体也一起表达,表达时间3小时、7小时,跑胶做western blotting,结果发现我的载体只表达出GST标签蛋白
我的western 图片,有标注,到底什么原因?求助
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李彦辉

铜虫 (正式写手)

maker确定没看错?
2楼2010-01-20 20:46:05
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plantst5928

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
蛋白在表达的时候被剪切了,你试试低温诱导。条件温和一些。
3楼2010-01-20 23:43:07
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plantst5928

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我最近也在做,你的空载体表达GST是在上清还是沉淀?
4楼2010-03-03 20:45:12
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们这边也有一个这样的情况
表达了一半断了。
5楼2010-03-04 02:18:44
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