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铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求教椎间盘番红O染色染不上难题

求教一特殊染色,最近为了观察椎间盘糖胺多糖含量行HE-番红O染色,不成功,染成的片子在脱水时原有的红色见明显洗去,染出的片子很淡,如附件左边是我染的,右边是文献上的,求教各位前辈如何改进
我的染色方法如下
HE-番红染色
l)标本用4%多聚甲醛固定,常规脱水、透明处理后石蜡包理,制备成5μm
染色用切片。
2)组织切片脱蜡至水洗,常规苏木素一伊红(HE)染色。
3)HE染色后切片置于0 .5%番红O染液中染色5分钟。
4)自来水冲洗
5)梯度酒精脱水透明 (95%酒精,纯酒精和二甲苯,各两次每次2分钟)
6)封片备用
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