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362385496

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】透析袋透析蛋白质的问题

本人要提取大鼠脑全蛋白,用2%SDS裂解液裂解后,想把蛋白从裂解液中分离出来,请问可以使用透析袋透析吗?SDS裂解液是否会对透析袋有影响?还有什么其他方法可以实现我这一目的?(没有高速离心机)
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qingfengwu

金虫 (小有名气)


362385496(金币+1,VIP+0): 1-18 14:09
不用透析袋吧,一般来讲,你使用RIPA buffer使用电动匀浆器进行匀浆,尽量保证没有任何可以看到的碎片,RIPA buffer 的量和配方你可以上网查到。
其中RIPA buffer 中要加入足量的蛋白酶抑制剂。匀浆后放在4度混合器里混合1个小时左右,就离心。12000 rpm 10-15min就可以了。不要说你们12000rpm的离心机都没有。4度离心。就可以得到你要的东西了。
2楼2010-01-18 13:10:20
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