应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】siRNA Transfection
61/1返回列表
查看: 512  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

gagalady

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】siRNA Transfection 已有2人参与

虫虫们？
   我将要siRNA 转染，在稀释转染试剂时 需用无血清培养基（serum-free medium），那这个培养基里含有 谷氨酰胺吗 。
  我用的是TransIT-TKO Transfection Reagent, 说明书上说用Opti-MEM 或 RPMI-1640这两种无血清培养基，
  请问高手，那可以用DMEM  这种培养基稀释此转染试剂吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2010-01-13 14:21:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)
推荐您如果使用威格拉斯的转染试剂VigoFect就没这么麻烦了。不仅可以转SiRNA，而且还可以带血清和双抗都不影响，操作也简单，可以不用培养基稀释，直接用生理盐水稀释就行，转染效率还很高。
另外它是非脂质体阳离子类的，比脂质体的那种毒性也小。
赞一下 回复此楼
2楼2010-03-18 11:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gagalady

新虫 (正式写手)

感谢

引用回帖:
Originally posted by lansha8331 at 2010-03-18 11:25:48:
推荐您如果使用威格拉斯的转染试剂VigoFect就没这么麻烦了。不仅可以转SiRNA，而且还可以带血清和双抗都不影响，操作也简单，可以不用培养基稀释，直接用生理盐水稀释就行，转染效率还很高。
另外它是非脂质体阳 ...

要谢谢你  拓宽了我的转染视野    学到不少东西呢  
  你再告诉我这个威格拉斯这个转染试剂   也可以在网上订购吧
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-18 14:14:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lansha8331

无虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gagalady at 2010-03-18 14:14:25:

  要谢谢你  拓宽了我的转染视野    学到不少东西呢  
  你再告诉我这个威格拉斯这个转染试剂   也可以在网上订购吧

是的啊，可以网上订购的，给你一些威格拉斯公司的信息吧：

威格拉斯生物技术（北京）有限公司
主要从事分子生物试剂盒（核酸类，蛋白类，细胞类等种类丰富多样）的研发，生产和销售等。
详见公司网站:http://www.vigorousbio.com/
或展台http://www.bioon.com.cn/company/index.asp?id=88470折扣优惠。
代理或者经销商可以通过以下方式联系：
QQ：1061980739 E-mail：vigorousbio@126.com
电话：010-58941251 010-58941231
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-18 14:30:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hui_student

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我想问下，我现在是用的Lipofecter脂质体转染Hela细胞，转染的是重组的真核表达质粒，说明书上讲要用不含抗生素和谷氨酰胺的DMEM稀释，这其中的谷氨酰胺是什么作用？我们实验室用的RPMI1640，里面已经加了谷氨酰胺，包含此物质对转染影响大么？望前辈赐教！急等中！！！！
赞一下(1人) 回复此楼
一路前行！
5楼2010-04-12 22:36:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gagalady

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hui_student at 2010-04-12 22:36:08:
我想问下，我现在是用的Lipofecter脂质体转染Hela细胞，转染的是重组的真核表达质粒，说明书上讲要用不含抗生素和谷氨酰胺的DMEM稀释，这其中的谷氨酰胺是什么作用？我们实验室用的RPMI1640，里面已经加了谷氨酰胺 ...

L-谷氨酰胺在是重要的。脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。
我转染的时候 用的稀释液是不含谷氨酰胺、不含血清、不含抗生素的培养基
赞一下 回复此楼
6楼2010-04-18 09:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gagalady 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +6 Auroracx 2026-03-22 6/300 2026-03-22 11:43 by chixmc
[考研] 275求调剂 +3 shansx 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:43 by 。。堂堂
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 326求调剂 +5 诺贝尔化学奖觊� 2026-03-15 8/400 2026-03-21 19:33 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 十三加油 2026-03-21 5/250 2026-03-21 18:48 by 学员8dgXkO
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭