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【求助】关于胶体金标记巯基化DNA的问题
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请教各位，我想用巯基化的DNA标记胶体金，为什么总是连接不上呢？一加入NaCl，胶体金就开始聚集，请问有谁知道是为什么吗？谢谢了！ [ Last edited by wdwsnnu on 2010-1-12 at 23:02 ] |
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2楼2010-01-12 19:42:33
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4楼2010-01-13 08:21:32
| 各位大侠，我的胶体金是柠檬酸钠还原氯金酸的方法合成的，修饰的步骤是往胶体金中加入巯基化的DNA，然后在摇床上避光反应16个小时后，逐步加入了2M的NaCl使其浓度从0.1M到0.2M 最后到0.3M, 但是当我在加入NaCL的过程中，胶体金的颜色就变色了，变成蓝灰色，这样应该就说明DNA没有接上吧 ，如果接上的话应该是不会变色的，之前做的时候没有加入NaCl陈化，但是在用PBS洗涤的时候就变色了，而且离心的时候根本离不下东西来，此外我还看过有的文献说巯基化的DNA溶液形成二聚体，是否有必要先用DTT或者TCEP对巯基化的DNA 进行还原后再标记呢，还有离心管需要进行硅烷化吗？ 请各位多多指教啊~~~ |
5楼2010-01-13 09:41:39
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首先，保证金纳米的质量； 其次，DNA的纯度和SH修饰的质量； 另外，可以考虑开始的时候，加的NaCl浓度不要太高（比如0.5M 0.1M）。 http://www.nature.com/nprot/journal/v1/n1/abs/nprot.2006.38.html |
6楼2010-01-13 10:42:02
