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汕头大学海洋科学接受调剂
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sirius8528

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】DNA 电泳问题

我在做DNA电泳时,跑出来的胶为什么上半部分发白,而下面发暗,整个胶的颜色不统一,我不明白啊,,,谢谢!
我在补充个问题啊,我上样空里怎么有DNA没跑下来啊,我是一个材料和DNA 反应的

[ Last edited by sirius8528 on 2010-1-6 at 19:12 ]
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

电压和电流是多少?
2楼2010-01-06 18:40:33
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 1-6 19:45
上半部分亮,下半部分暗,是因为EB和DNA的泳动方向相反,EB带正电,向负极方向泳动,所以电泳之后会出现胶明暗分离,解决办法,少放EB或者将废胶放在下方进行电泳。

图上基因组DNA是上面的条带,还是下面的啊?怎么会两条带啊
3楼2010-01-06 19:00:29
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sirius8528

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by sirius8528 at 2010-1-6 18:30:
我在做DNA电泳时,跑出来的胶为什么上半部分发白,而下面发暗,整个胶的颜色不统一,我不明白啊,,,谢谢!

我电压90,电流好像40多
4楼2010-01-06 19:04:04
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sirius8528

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-6 19:00:
上半部分亮,下半部分暗,是因为EB和DNA的泳动方向相反,EB带正电,向负极方向泳动,所以电泳之后会出现胶明暗分离,解决办法,少放EB或者将废胶放在下方进行电泳。

图上基因组DNA是上面的条带,还是下面的啊? ...

谢谢啊,我下次试一试,我现在是做一个材料和DNA反应。
5楼2010-01-06 19:06:15
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sirius8528

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-1-6 18:40:
电压和电流是多少?

我电压90.电流40左右。
6楼2010-01-06 19:06:41
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sirius8528

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-6 19:00:
上半部分亮,下半部分暗,是因为EB和DNA的泳动方向相反,EB带正电,向负极方向泳动,所以电泳之后会出现胶明暗分离,解决办法,少放EB或者将废胶放在下方进行电泳。

图上基因组DNA是上面的条带,还是下面的啊? ...

已经好了,谢谢!
7楼2010-01-07 16:28:28
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by sirius8528 at 2010-1-7 16:28:

已经好了,谢谢!

你好!请问你是怎么弄好的?我跟你遇到过相同的疑问,亮暗不一的问题你什么原因,是通过少加EB解决的吗?  还有孔里没跑出来的东西是什么?是基因组么?为什么跑不出来呢?太大了?我做菌液PCR时常出现这样问题,而其它的又没有,还有我点15KB的Marker时候也会出现跑不出来留在胶孔里的情况。我一直认为是分子量太大,不知对否?
8楼2010-01-07 16:58:56
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sirius8528

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by tuodecai at 2010-1-7 16:58:

你好!请问你是怎么弄好的?我跟你遇到过相同的疑问,亮暗不一的问题你什么原因,是通过少加EB解决的吗?  还有孔里没跑出来的东西是什么?是基因组么?为什么跑不出来呢?太大了?我做菌液PCR时常出现这样问题 ...

少放EB并且将废胶放在下方进行电泳,就行了。
其它的我也不知道。
9楼2010-01-08 14:24:01
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mltragassi

金虫 (正式写手)


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没跑出来是因为蛋白质没完全与SDS结合吧?你样品处理液里面加入能和蛋白结合的物资没啊?
10楼2010-01-08 16:32:28
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