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sunxiaoyu

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pcr时模版加入量

鉴定用pcr模版加入量如何选择？浓度是用ng来表示的？刚开始接触pcr，望各位高人指点迷津，推荐一下该看哪些东西
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1楼 2010-01-06 12:57:50
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feng509

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+3,VIP+0):同意 1-6 13:59
可以自己尝试下 20微升体系加上个1微升的模版就差不多了
当然也要看你的模版浓度了 可以根据P出来的结果来定夺
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爱，起于微笑，浓于亲吻，逝于泪水
2楼2010-01-06 13:19:55
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sunxiaoyu

铜虫 (初入文坛)
1949stone(金币+0,VIP+0):关键在于经验 1-6 13:59
那这个加多加少会影响条带亮度吗？我加0.8的可以，换成0.5也行
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3楼2010-01-06 13:25:20
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feng509

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的模版多长的  产物多长的  模版多的话会出现两条带的
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爱，起于微笑，浓于亲吻，逝于泪水
4楼2010-01-06 14:13:58
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gaozx123

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DNA的浓度单位是ng/ul，50ng/ul的模板加个1ul就够了
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5楼2010-01-06 14:38:33
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般总浓度0.1ng/ul-100ng/ul，都能P出来，根据经验酚氯仿提取的DNA，稀释1-100倍范围内做梯度，25ul体系加1ul，基本可以保证P出来，如果是使用盒子，那么建议1-50倍稀释就好了，盒子提取的质量可能会好一些，但浓度一般都会小一点。
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6楼2010-01-06 15:25:53
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1514132

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果用ExTaq酶做PCR，模板最多加至3ul,用PFU高保真酶的话，1ul足够了。
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7楼2010-01-06 15:35:54
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