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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒跑电泳为什么会有三条带？？？
汕头大学海洋科学接受调剂
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zcsalamander

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】质粒跑电泳为什么会有三条带？？？

虫友帮忙解释一下！谢谢，越详细越好！
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1楼 2010-01-04 13:12:09
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 1-4 16:52
正常情况吧，分别为超螺旋，开环，和复制中间体。最后一步不用EB，用灭菌蒸馏水试试。
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-01-04 13:57:40
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hyde0706

木虫 (正式写手)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):同意 1-4 16:52
应该是开环，超螺旋，线状吧？
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3楼2010-01-04 14:38:10
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hyde0706 at 2010-1-4 14:38:
应该是开环，超螺旋，线状吧？

不对，没有线状的，不信你将质粒单酶切，与不酶切对照跑电泳，单酶切的产物与质粒的三条带都不一样。说明提质粒不会出现线状的。
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Thank-you，so-blue.
4楼2010-01-04 17:23:30
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j2

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
哇，提的好好哦！三种构型都出来了。我一般只出来2种。3种分别为超螺旋，开环，和复制中间体
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
5楼2010-01-04 17:29:37
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hyde0706

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-1-4 17:23:

不对，没有线状的，不信你将质粒单酶切，与不酶切对照跑电泳，单酶切的产物与质粒的三条带都不一样。说明提质粒不会出现线状的。

学习了！我搞错了。
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6楼2010-01-04 17:34:52
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yangguoliguo

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
提取质粒时电泳结果出现三条带：
跑的最快的一条是超螺旋结构，其次是开环状的，离点样孔最近的是线状的。
造成这种结果的直接原因：在质粒提取过程中反复颠倒用力不均或过大。
但是还是要恭喜你，提质粒出现三种情况，可以更好的分辨你所需要的完整质粒。
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天行健，君子以自强不息地势坤，君子以厚德载物
7楼2010-01-04 18:00:31
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zcsalamander

新虫 (初入文坛)
学习了！谢谢大家
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8楼2010-01-04 23:30:33
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ln0401

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
碱法提取质粒是没有线性的，三条带以电泳速度的快慢而排序，分别是超螺旋、开环和复制中间体。我做过酶切，线性的与三条带位置不一样。
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9楼2010-01-05 10:10:51
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