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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 复合材料 » 【求助】细胞团聚
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wchaozhong

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】细胞团聚

我想观察pc12细胞的分化形态，但总是出现团聚，对实验结果的统计很不利，有没有高手能指点一下如何解决细胞的团聚问题
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1楼 2010-01-03 21:38:13
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milk5852

禁虫 (著名写手)
★ ★
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yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论 ！！ 1-4 07:12
本帖内容被屏蔽
2楼2010-01-03 22:38:46
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jingwang7793

金虫 (小有名气)

细胞聚团

★ ★
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yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论！！！！ 1-5 07:06
原因有2个:1.细胞密度过大; 2. 吹打不均匀,导致细胞没有完全分散开.
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JingWang
3楼2010-01-04 07:41:55
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wchaozhong

铜虫 (初入文坛)
谢谢大家的回复！
我每次都吹很多遍，这种细胞系吹长了碎片很多，细胞密度并不大，用注射器过滤以后过一段时间还是有团聚的，种到材料上面的细胞长一段时间后也会成团，最后固定细胞的时候用PBS洗就很容易洗掉，材料不能经过包被这个步骤，不知道有没有更好的分散方法
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4楼2010-01-04 16:33:54
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qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论！！！！ 1-5 07:06
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):再加一个~ 1-5 09:45
引用回帖:
Originally posted by wchaozhong at 2010-1-4 16:33:
谢谢大家的回复！
我每次都吹很多遍，这种细胞系吹长了碎片很多，细胞密度并不大，用注射器过滤以后过一段时间还是有团聚的，种到材料上面的细胞长一段时间后也会成团，最后固定细胞的时候用PBS洗就很容易洗掉， ...

分化前的PC12是属于半贴壁半悬浮细胞，容易成团好像就是它的特性……这个细胞是不是不用消化就可以传代？对培养皿进入包被有没有是不是可以其促进粘附，减少聚集？
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5楼2010-01-04 17:28:13
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glossitian

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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yusen_1982(金币+1,VIP+0):欢迎讨论！！！！ 1-5 07:06
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):新虫子再加一个~~ 1-5 09:46
可能是消化时间的问题。可以试试稍微延长trypsin+EDTA的消化时间，成单细胞悬液以后离心吹打30下，再传代到新的培瓶中。还有就是有可能是培液成分的问题。PC12是一种比较挑剔的细胞。我养的时候，先用的是分装好的Hyclone的DMEM进行培养，中间用完了，拿自己用DMEM粉末配的培液培养，就开始团聚了。
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6楼2010-01-04 23:56:52
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sohigho

银虫 (小有名气)
★ ★
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-03-25 08:16
细胞吹打时切忌出现大的气泡，这样会对细胞造成伤害，甚至使细胞变成碎片
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7楼2010-03-24 11:36:34
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