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allica

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求助:衍生可重复性差

现在做一种单糖的定量,用GCMS。前处理用氮吹将样品吹干,加100ul吡啶和100ul的BSTFA(1%TMCS),78摄氏度60min。分子中三个羟基变成三个三甲基硅烷基。正己烷定容进样。现在的问题是同样的三个重复之间差异很大(30%)。不知道是氮吹将样品吹跑了还是衍生化过程的问题。请高手指教。。。。感谢!!!!
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
happy169(金币+3,VIP+0):^_^ 12-30 16:17
你说的两种可能都会有的吧,但还有一个更为重要的问题就是你的100ul误差可能也很大吧,这样你的样品也太少了,建议你做个更大量的,比如你用能?o1ml吡啶的量来做,效果会好的多,另外一定要保证你的衍生时一起做,条件能完全相同。
2楼2009-12-30 12:23:13
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zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)


opq691(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流,提前祝福元旦快乐,欢迎常来分析版及专家版交流讨论 12-31 20:30
先不用氮吹干燥,看看再往下分析问题
3楼2009-12-30 14:26:44
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allica

新虫 (小有名气)


opq691(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流,提前祝福元旦快乐,欢迎常来分析版及专家版交流讨论 12-31 20:30
好的  我用真空干燥箱干燥做一下试试。。
4楼2009-12-31 10:08:20
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fallingash

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢回复 1-4 19:58
BSTFA稳定性较差,看看有没有分解
这样小的定容体积确实在准确度方面有很大的问题,你可能是完全按照标准操作了.
一般这样的标准我都不完全参照,我用的最小定容体积 是0.5毫升
TheShawshankRedemption
5楼2010-01-04 19:24:02
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allica

新虫 (小有名气)

奥 ,我是先用100ul的吡啶和100ul的BSTFA反应结束后,加入300ul的正己烷定容至500ul的。
6楼2010-01-05 11:01:40
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