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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】接种量应该怎么确定？
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cindererra

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】接种量应该怎么确定？

请问各位，我现在做摇瓶发酵，但是种液的浓度时高时低。比如我一般是种液培养14个小时后转接发酵培养基中，正常情况下种液浓度能到2点几，但有时候只有零点几，这个时候我是应该延长种子培养时间呢，还是直接定时转接但同时扩大接种量使发酵培养基菌液初浓度与种液浓度在2点几的时候的发酵液初浓度一样？
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1楼 2009-12-28 17:33:56
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guohuayin

木虫 (著名写手)

博士，副教授
不知道你用多大的浓度，但是浓度太高，对于细菌的生长是不利的，有些细菌细胞会破裂，你最好按照算好的时间培养细胞，定时测定一下浓度。
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内生菌资源和核酸分子的利用
2楼2009-12-28 18:07:09
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cindererra

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by guohuayin at 2009-12-28 18:07:
不知道你用多大的浓度，但是浓度太高，对于细菌的生长是不利的，有些细菌细胞会破裂，你最好按照算好的时间培养细胞，定时测定一下浓度。

我是说种液，一般情况下我要2.0左右，但是有时候一样的时间（比如说14个小时）它只能长到0.8左右，这个时候我要用这个种液转接发酵培养基，是让它继续长一直到2.0呢还是增加接种量？
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3楼2009-12-28 18:33:33
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gandalf886

银虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
Originally posted by cindererra at 2009-12-28 18:33:

我是说种液，一般情况下我要2.0左右，但是有时候一样的时间（比如说14个小时）它只能长到0.8左右，这个时候我要用这个种液转接发酵培养基，是让它继续长一直到2.0呢还是增加接种量？

你应该让种子继续长，到2.0之后再接种。
建议先做生长曲线，隔两个小时取样测OD。接种时间应该是对数中后期，但这个中后期是按照生长曲线上的OD值来说的，并不能单纯的看时间。
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4楼2009-12-28 20:59:43
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dy_414

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果是常用种子把生长曲线测了吧，一目了然了。
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我坚信，rp是攒出来的
5楼2009-12-28 21:01:25
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chenkejie

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
估计你种子做的时候每一批次可能有较大的差别，不够稳定。
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6楼2010-01-02 12:11:05
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