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铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】求助：NEFA测定

各位虫友，请问有谁测过血清中游离脂肪酸（NEFA/FFA）吗？

我买的试剂盒是南京建城的，测定原理：游离脂肪酸能与铜离子结合形成脂肪酸的铜盐而溶于氯仿中，其量与游离脂肪酸含量成正比。用铜试剂测定其中铜离子的含量，即可推算出游离脂肪酸的含量。

我有几下几个问题：
1、如果血清样本不够（不足200uV），可以自己调整用量吗？如果可以，一般血清和反应液是怎么调整？
2、在准确抽提（2分钟）这一步，我用的是涡旋仪，到底涡旋到什么程度才算好？我们实验时（涡旋很充分）离心后下层有很多胶冻样物质，挑破后再离心胶冻物质依然很厚（实验时天气气温：4度左右）。
3、在弃去上层蓝色液体及胶冻物质时，弃到多干净为止？有何技巧？
4、在用穿刺针取下层液体时，有何技巧可尽量少污染？

不知哪位高手能帮帮我分析一下，最近两次实验数据不太一样，谢谢，万分感谢！！

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