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【求助/交流】关于葡萄糖试剂盒测定葡萄糖的干扰因素
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关于葡萄糖试剂盒测定葡萄糖的干扰因素： 看到有兄弟问起这个问题，对于试剂盒的测定还是有代表性的， 所以在这里开贴一起讨论。 问题： 要了解某测定的干扰因素，就需要知道其测定的原理，测定过程中发生的反应。 对于具体的某种干扰物质到底低到多少浓度就不影响测定结果（小于5%），这需要你做实验。 ------------------------------------------------------------------------------------------ 目前，葡萄糖测定试剂盒普遍采用葡萄糖氧化酶法测定，其实测定的是产生的过氧化氢。 『原 理』 样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。 『试剂规格』 规格1 规格2 规格3 规格4 规格5 试剂 4×50ml 4×65ml 4×90ml 2×90ml 2×200ml 『试剂成份』 葡萄糖氧化酶＞10U/ml，过氧化物酶＞1U/ml，磷酸盐 70mmol/L，酚 5mmol/L， 4-氨基安替比林0.4mmol/L，pH 7.0。『样 本』 血清或血浆中的葡萄糖在2-8℃可保存24小时。 ---------------------------------------------------------------------------- 所以，样品中干扰测定过程的某些物质，就会成为试剂盒的干扰因素。例如，样品中也含有过氧化氢，当然会使测定结果偏高。 样品中含有细菌，如大肠杆菌，或某些酶类如过氧化氢酶等，由于有快速吸收和降解过氧化氢的能力，就会使测定结果偏低。 样品中含有某种重金属离子浓度过高，就会使酶活大幅降低，可能使测定结果偏低。 样品中含有高度还原性物质，如巯基乙醇，DTT或Vc, 会干扰测定结果，可以使测定结果偏低。 样品中含有的不参加反应的二糖或多糖等多羟基物质，例如蔗糖、果糖或甘露醇等（1-10 g/L)，一般不会干扰葡萄糖的测定。 以上因素的干扰程度，可以用纯的葡萄糖溶液加一系列的干扰物质来测定。 对于具体的某种干扰物质到底低到多少浓度就不影响测定结果（《5%），这需要你做实验。  附葡萄糖测定试剂盒说明书PDF（其中提到了几个常见的干扰因素）  http://www.rsbio.com/admin/upfile/UploadFile/2008613142252338.pdf [ Last edited by HarveyWang on 2009-12-28 at 11:19 ] |
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zhanglijia
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