[交流] 【求助】影响LH-20反向柱分离极性大化合物的因素

Originally posted by 皇阿玛 at 2009-12-28 22:51:
流动相：甲醇——水，乙腈——水，甲醇——水用得较多；
柱子可以长些，但填料不要装得太多；长柱子，加溶剂后可以起到加压的作用，当然也可以使用加压泵；
反相柱流速本来就很慢，常压，附带冲反相柱，不敢时间 ...

Originally posted by yymslx2010 at 2009-12-28 23:38:
装材料一般就到达柱口10-20cm为好吧，否则不好上样！

Originally posted by yymslx2010 at 2009-12-29 21:09:
凝胶上样时，样品要过滤的，上样时溶解溶剂应越少越好，否则色带拉太长，影响分离效果。刚上样品后流速不宜过快，我们一般7秒左右，样品下到中间后流速可以调快点。

Originally posted by yymslx2010 at 2010-1-5 22:15:
11楼的朋友，7s就是流速为7秒钟滴一滴，一般7s左右就可以了，凝胶我还没听过要加压的，个人认为没有加压的必要，不加压都流的很快了。流速慢点的话分离效果很好的！

Originally posted by zinedine at 2010-1-6 23:09:
LH-20反相柱？你说的是sephadxe LH-20吧，这种凝胶根据洗脱剂的不同会有正相反相分离之分，一般正相用氯仿-甲醇，反相用甲醇或甲醇-水，正相分离靠分子量，反相分离主要靠样品跟凝胶的吸附能力，柱长和内径影响不 ...