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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 【求助】PCR的条带时有时无，什么原因？
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】PCR的条带时有时无，什么原因？

我验证特异性引物，用来做验证的菌有时候能扩出来，有时候扩不出来，而且是分离自不同产地同种产品的同一种菌，有的总能扩出来，有的总是扩不出来。
不知道怎么回事，请大家帮忙分析下，谢谢！
例如，我的图上，1为目的菌，2和3（做特异性验证的菌，不应扩出来）是分离自不同产地同种产品的同一种菌，2总是扩不出来，但3老能扩出来。
4是目的菌，5和6 也是分离自不同产地同种产品的同一种菌，5总能扩出来，6扩不出来。
请各位指点！
谢谢！
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1楼 2009-12-27 13:15:42
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febblue

金虫 (小有名气)
不懂，帮你顶一下。
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2楼2009-12-28 09:41:01
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qishujie

新虫 (小有名气)
★
三个小石子(金币+1,VIP+0):感谢讨论，理工农林版因你的参与而更精彩！ 12-28 13:07
可能是楼主所用的引物特异性不好，还有可能就是不同产地的同品种确实存在差异，这个要尊重试验事实了 ，哈哈
赞一下(10人) 回复此楼
认真做事,低调做人
3楼2009-12-28 09:47:07
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seamuse

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议扩展高质量引物数目筛选，不过构建特征引物挺花钱的。
赞一下(1人) 回复此楼
When you want success as badly as you wanted air, you will get it.----------------------一个人只有当他把追求真理当作一种内在的需要时，才算是真正的...
4楼2009-12-28 18:33:54
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by febblue at 2009-12-28 09:41:
不懂，帮你顶一下。

谢谢！
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5楼2009-12-28 21:34:24
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qishujie at 2009-12-28 09:47:
可能是楼主所用的引物特异性不好，还有可能就是不同产地的同品种确实存在差异，这个要尊重试验事实了 ，哈哈

谢谢回复！
关键是能扩出来和扩不出来的是同一种菌
不知道怎么解释
赞一下 回复此楼
6楼2009-12-28 21:36:11
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by seamuse at 2009-12-28 18:33:
建议扩展高质量引物数目筛选，不过构建特征引物挺花钱的。

是呀
合成了不少引物了，花了不少钱了，就是没结果...
头疼中...
赞一下 回复此楼
7楼2009-12-28 21:37:11
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