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小虫之老虫

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】PCR的条带时有时无,什么原因?

我验证特异性引物,用来做验证的菌有时候能扩出来,有时候扩不出来,而且是分离自不同产地同种产品的同一种菌,有的总能扩出来,有的总是扩不出来。
不知道怎么回事,请大家帮忙分析下,谢谢!
例如,我的图上,1为目的菌,2和3(做特异性验证的菌,不应扩出来)是分离自不同产地同种产品的同一种菌,2总是扩不出来,但3老能扩出来。
4是目的菌,5和6 也是分离自不同产地同种产品的同一种菌,5总能扩出来,6扩不出来。
请各位指点!
谢谢!
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febblue

金虫 (小有名气)

不懂,帮你顶一下。
2楼2009-12-28 09:41:01
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qishujie

新虫 (小有名气)


三个小石子(金币+1,VIP+0):感谢讨论,理工农林版因你的参与而更精彩! 12-28 13:07
可能是楼主所用的引物特异性不好,还有可能就是不同产地的同品种确实存在差异,这个要尊重试验事实了 ,哈哈
认真做事,低调做人
3楼2009-12-28 09:47:07
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seamuse

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议扩展高质量引物数目筛选,不过构建特征引物挺花钱的。
When you want success as badly as you wanted air, you will get it.----------------------一个人只有当他把追求真理当作一种内在的需要时,才算是真正的...
4楼2009-12-28 18:33:54
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by febblue at 2009-12-28 09:41:
不懂,帮你顶一下。

谢谢!
5楼2009-12-28 21:34:24
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by qishujie at 2009-12-28 09:47:
可能是楼主所用的引物特异性不好,还有可能就是不同产地的同品种确实存在差异,这个要尊重试验事实了 ,哈哈

谢谢回复!
关键是能扩出来和扩不出来的是同一种菌
不知道怎么解释
6楼2009-12-28 21:36:11
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小虫之老虫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by seamuse at 2009-12-28 18:33:
建议扩展高质量引物数目筛选,不过构建特征引物挺花钱的。

是呀
合成了不少引物了,花了不少钱了,就是没结果...
头疼中...
7楼2009-12-28 21:37:11
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