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wangwupeng

银虫 (小有名气)

[交流] 【交流】黄酮类物质的精制

准备做黄酮类物质,就想寻找提取的最佳工艺,希望大家多多交流
  首先,我准备做个大孔树脂的静态吸附试验,看了一些资料,知道上大孔树脂前,样品液要预处理,我用75%的乙醇回流提取过我到中药材后,过滤,低压浓缩后加了95%的乙醇去除资料上说的纤维素,蛋白质等物质,过滤浓缩定容后,我再次去测吸光度,吸光度竟然没有精制前的大了,75%的提取物测得吸光度是1点多,精制后的竟然成了0点多,差的很多。我想问问做黄酮类富集的师哥师姐以及同届人,大家是怎么做得。
  其次,我用芦丁做对照品测行不?看资料说这黄酮类物质分为苷类与苷元,我也感觉一种植物里面的黄酮类物质很多,都在500nm左右测吸光度有点不对劲,在声明一点。我在500nm测定时,用了亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠做显色剂,但是在500nm处芦丁的吸光度并不是最强的,当然,我的样品因为在500nm处的吸光度的峰很单一,不像芦丁的320nm吸收强度最强时,在320nm左右样品液的吸收峰很杂,却也很强。做过这个的都说说你们的峰是跟文献上说的那样,还是?如是像文献上说的那样你的芦丁对照品以及样品液在500nm左右都有吸收,且是最强吸收,麻烦你告我下你的具体操作,我实在是做了10次了都没有做出文献上说的那种效果。真的希望能在大家的帮助下早点跨过这一步。
   每一跟我交流的人,我都在此衷心的感谢!
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qingshui8207

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-26 18:44
472514568(金币+1,VIP+0):谢谢回帖! 12-26 23:05
上大孔树脂前,样品液预处理:我用75%的乙醇回流提取过中药材后,蒸出乙醇后可以直接上样。
在500nm测定时,用了亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠助色剂,在500nm处芦丁的吸光度可能不是最强的。我做的在510nm测定的,测含量并不一定吸收峰最强。
研究黄铜时可以用化学显色剂入三氯化铝等。大孔树脂只是进行分段或富集,单体还需要色谱柱啊!
2楼2009-12-26 17:42:50
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qingshui8207

木虫 (著名写手)

不是无色,而是芦丁颜色较浅。
3楼2009-12-26 17:44:21
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清风过

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
472514568(金币+1,VIP+0):谢谢回帖! 12-27 10:02
如果你的样品没显色就在500nm处有吸收,你就不能直接用该显色法测定。你的样品必须纯化后,在500nm处样品本身没有吸收才可以用显色法测定。因为黄酮-Al 络合显色吸收就是很弱,但对于纯品芦丁来说,在此处没有干扰,完全可以用来定量。
4楼2009-12-27 08:53:26
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