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yoyoyehan

[交流] 【求助/交流】关于原核表达诱导浓度

请问大家:做原核表达IPTG诱导的浓度该是多少呀?
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 12-24 21:05
一般都采用终浓度为1mmol的,不过具体到各个蛋白可能有差异,要做优化才能得到最佳的诱导浓度;另外诱导时间等也会影响到表达量。
霉菌
2楼2009-12-24 16:17:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 12-24 21:05
诱导温度、时间、剂量均需要自己摸索,没有通用的
3楼2009-12-24 16:37:56
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thinka

铜虫 (著名写手)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 12-24 21:05
正常的思维是自己摸条件的,必要的时候得高通量筛选
4楼2009-12-24 20:02:46
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刘超_2009

新虫 (小有名气)

1mmol/l的,加1/1000,诱导8小时左右吧
5楼2010-01-20 16:05:08
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yoyocan

金虫 (正式写手)


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不同的蛋白 浓度不同! 浓度 时间 都需要自己摸索
6楼2010-01-20 16:45:53
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littlecoffee

银虫 (初入文坛)


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我一般从1mM开始往下调,0.8,0.6,0.4mM等,跑电泳检测看诱导条带的强弱。
7楼2010-01-21 17:22:22
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qdwmq

木虫 (正式写手)

一般是1mM
我也用过0.1 0.5 区别不大
温度一般37
也有 42 28 20 16 乃至4
8楼2010-01-29 11:02:40
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